华东理工大学学报（自然科学版）
華東理工大學學報（自然科學版）
화동리공대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF EAST CHINA UNIVERSITY OF SCIENCE AND TECHNOLOGY(NATURAL SCIENCE)
2008年
5期
660-664
,共5页
谭黎%欧阳立明%丁庆豹%欧伶
譚黎%歐暘立明%丁慶豹%歐伶
담려%구양립명%정경표%구령
大肠杆菌%嘌呤核苷磷酸化酶%尿苷磷酸化酶%胸苷磷酸化酶%表达
大腸桿菌%嘌呤覈苷燐痠化酶%尿苷燐痠化酶%胸苷燐痠化酶%錶達
대장간균%표령핵감린산화매%뇨감린산화매%흉감린산화매%표체
将大肠杆菌K-12菌株来源的嘌呤核苷磷酸化酶、尿苷磷酸化酶和胸苷磷酸化酶基因分别克隆到pET-11a载体并转化大肠杆菌BL21(DE3)宿主菌表达,通过SDS-PAGE分析和酶的活性测定,重组菌诱导表达后目的蛋白的表达量占菌体总蛋白的37%以上,与产核苷磷酸化酶的野生菌比较,酶的活性也有显著提高.在特异反应条件下,构建的工程菌可以用来高效催化核苷的转糖基反应.
將大腸桿菌K-12菌株來源的嘌呤覈苷燐痠化酶、尿苷燐痠化酶和胸苷燐痠化酶基因分彆剋隆到pET-11a載體併轉化大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌錶達,通過SDS-PAGE分析和酶的活性測定,重組菌誘導錶達後目的蛋白的錶達量佔菌體總蛋白的37%以上,與產覈苷燐痠化酶的野生菌比較,酶的活性也有顯著提高.在特異反應條件下,構建的工程菌可以用來高效催化覈苷的轉糖基反應.
장대장간균K-12균주래원적표령핵감린산화매、뇨감린산화매화흉감린산화매기인분별극륭도pET-11a재체병전화대장간균BL21(DE3)숙주균표체,통과SDS-PAGE분석화매적활성측정,중조균유도표체후목적단백적표체량점균체총단백적37%이상,여산핵감린산화매적야생균비교,매적활성야유현저제고.재특이반응조건하,구건적공정균가이용래고효최화핵감적전당기반응.
