时珍国医国药
時珍國醫國藥
시진국의국약
LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH
2009年
1期
74-76
,共3页
邵敏%周鹤峰%唐历波%刘银花%李官成
邵敏%週鶴峰%唐歷波%劉銀花%李官成
소민%주학봉%당력파%류은화%리관성
沉香%RAPD%基因组DNA%反应体系
沉香%RAPD%基因組DNA%反應體繫
침향%RAPD%기인조DNA%반응체계
目的 对影响沉香随机扩增多态性DNA(RAPD)反应的各因素进行优化,建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系.方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA,变化单一因素的方法对模板 DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg2+浓度、退火温度对RAPD影响进行分析.结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系:在20μl反应体系中,模板DNA用量20 ng、Taq酶1.0 U、dNTPs浓度为0.3～0.4 mmol·L-1、随机引物浓度为0.6 μmol·L-1、Mg2+浓度1.5～2.0 mmol·L-1.PCR反应条件:94℃,10 min;94℃,1 min;36℃,1 min;72℃,2 min;45个循环,72℃,8 min.结论该反应体系具有良好的稳定性和重复性.
目的 對影響沉香隨機擴增多態性DNA(RAPD)反應的各因素進行優化,建立適用于沉香RAPD的最佳反應體繫.方法採用改良的CTAB法提取基因組DNA,變化單一因素的方法對模闆 DNA濃度、Taq酶用量、dNTPs、引物濃度、Mg2+濃度、退火溫度對RAPD影響進行分析.結果建立瞭適閤沉香RAPD分析的最佳反應體繫:在20μl反應體繫中,模闆DNA用量20 ng、Taq酶1.0 U、dNTPs濃度為0.3～0.4 mmol·L-1、隨機引物濃度為0.6 μmol·L-1、Mg2+濃度1.5～2.0 mmol·L-1.PCR反應條件:94℃,10 min;94℃,1 min;36℃,1 min;72℃,2 min;45箇循環,72℃,8 min.結論該反應體繫具有良好的穩定性和重複性.
목적 대영향침향수궤확증다태성DNA(RAPD)반응적각인소진행우화,건립괄용우침향RAPD적최가반응체계.방법채용개량적CTAB법제취기인조DNA,변화단일인소적방법대모판 DNA농도、Taq매용량、dNTPs、인물농도、Mg2+농도、퇴화온도대RAPD영향진행분석.결과건립료괄합침향RAPD분석적최가반응체계:재20μl반응체계중,모판DNA용량20 ng、Taq매1.0 U、dNTPs농도위0.3～0.4 mmol·L-1、수궤인물농도위0.6 μmol·L-1、Mg2+농도1.5～2.0 mmol·L-1.PCR반응조건:94℃,10 min;94℃,1 min;36℃,1 min;72℃,2 min;45개순배,72℃,8 min.결론해반응체계구유량호적은정성화중복성.
