中国农学通报
中國農學通報
중국농학통보
CHINESE AGRICULTURAL SCIENCE BULLETIN
2009年
10期
6-10
,共5页
王铁东%逄大欣%欧阳红生
王鐵東%逄大訢%歐暘紅生
왕철동%방대흔%구양홍생
抗菌肽%天蚕素B%乳腺%基因表达%逆转录病毒
抗菌肽%天蠶素B%乳腺%基因錶達%逆轉錄病毒
항균태%천잠소B%유선%기인표체%역전록병독
为了研究天蚕抗菌肽在奶牛乳腺组织长期表达的可行性以及对大肠杆菌的抑制作用,将天蚕抗菌肽B(cecropinB,CB)的基因序列以哺乳动物偏爱的密码子优化后,合成了四条相互重叠的DNA片段,通过重叠延伸PCR法获得了天蚕抗菌肽B的基因,将其亚克隆至T栽体,测序正确后构建逆转录病毒载体pLNCX_bCP-cecB,经过包装细胞的包装,获得含有天蚕抗菌肽B表达框的逆转录病毒,注射入奶牛乳腺组织,通过琼脂板孔穴扩散法检测基因的表达及活性;实验结果表明,克隆的抗菌肽基因在乳腺中获得了表达,表达产物对大肠杆菌具有抑制作用,抑制效果可以持续至13天以上.
為瞭研究天蠶抗菌肽在奶牛乳腺組織長期錶達的可行性以及對大腸桿菌的抑製作用,將天蠶抗菌肽B(cecropinB,CB)的基因序列以哺乳動物偏愛的密碼子優化後,閤成瞭四條相互重疊的DNA片段,通過重疊延伸PCR法穫得瞭天蠶抗菌肽B的基因,將其亞剋隆至T栽體,測序正確後構建逆轉錄病毒載體pLNCX_bCP-cecB,經過包裝細胞的包裝,穫得含有天蠶抗菌肽B錶達框的逆轉錄病毒,註射入奶牛乳腺組織,通過瓊脂闆孔穴擴散法檢測基因的錶達及活性;實驗結果錶明,剋隆的抗菌肽基因在乳腺中穫得瞭錶達,錶達產物對大腸桿菌具有抑製作用,抑製效果可以持續至13天以上.
위료연구천잠항균태재내우유선조직장기표체적가행성이급대대장간균적억제작용,장천잠항균태B(cecropinB,CB)적기인서렬이포유동물편애적밀마자우화후,합성료사조상호중첩적DNA편단,통과중첩연신PCR법획득료천잠항균태B적기인,장기아극륭지T재체,측서정학후구건역전록병독재체pLNCX_bCP-cecB,경과포장세포적포장,획득함유천잠항균태B표체광적역전록병독,주사입내우유선조직,통과경지판공혈확산법검측기인적표체급활성;실험결과표명,극륭적항균태기인재유선중획득료표체,표체산물대대장간균구유억제작용,억제효과가이지속지13천이상.
