实用医学杂志
實用醫學雜誌
실용의학잡지
THE JOURNAL OF PRACTICAL MEDICINE
2010年
15期
2690-2692
,共3页
程中衡%张泽米%杨芳%柳青梅%栾纯萍
程中衡%張澤米%楊芳%柳青梅%欒純萍
정중형%장택미%양방%류청매%란순평
骨肉瘤%Snail%转移%增殖%基因治疗
骨肉瘤%Snail%轉移%增殖%基因治療
골육류%Snail%전이%증식%기인치료
目的:探讨反义Snail转录因子对人骨肉瘤细胞株MG-63增殖和转移的影响.方法:用脂质体转染法将高转移性骨肉瘤细胞株MG-63分别转染反义Snail质(pGenesil-snail AS)和空载体质粒(pGenesil).G418筛选阳性细胞,获得稳定转染的阳性克隆.采用免疫组化、Western blot及半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测不同组MG-63骨肉瘤细胞中Snail表达;体外细胞运动实验及重组细胞基底膜(Matrigel)侵袭实验了解细胞转移潜能的改变;以噻唑蓝(MTT)比色法和克隆形成实验观察细胞增殖.结果:MG-63细胞内Snail表达明显,转染反义Snail质粒后,Snail表达明显被抑制.Snail表达下降的同时伴随着体外细胞增殖、黏附和侵袭力的抑制.结论:骨肉瘤细胞中存在Snail蛋白及mRNA的高表达,抑制Snail mRNA的表达对骨肉瘤细胞的侵袭、运动和增殖有抑制作用,可能为骨肉瘤的基因治疗提供新的靶点.
目的:探討反義Snail轉錄因子對人骨肉瘤細胞株MG-63增殖和轉移的影響.方法:用脂質體轉染法將高轉移性骨肉瘤細胞株MG-63分彆轉染反義Snail質(pGenesil-snail AS)和空載體質粒(pGenesil).G418篩選暘性細胞,穫得穩定轉染的暘性剋隆.採用免疫組化、Western blot及半定量逆轉錄-聚閤酶鏈反應(RT-PCR)檢測不同組MG-63骨肉瘤細胞中Snail錶達;體外細胞運動實驗及重組細胞基底膜(Matrigel)侵襲實驗瞭解細胞轉移潛能的改變;以噻唑藍(MTT)比色法和剋隆形成實驗觀察細胞增殖.結果:MG-63細胞內Snail錶達明顯,轉染反義Snail質粒後,Snail錶達明顯被抑製.Snail錶達下降的同時伴隨著體外細胞增殖、黏附和侵襲力的抑製.結論:骨肉瘤細胞中存在Snail蛋白及mRNA的高錶達,抑製Snail mRNA的錶達對骨肉瘤細胞的侵襲、運動和增殖有抑製作用,可能為骨肉瘤的基因治療提供新的靶點.
목적:탐토반의Snail전록인자대인골육류세포주MG-63증식화전이적영향.방법:용지질체전염법장고전이성골육류세포주MG-63분별전염반의Snail질(pGenesil-snail AS)화공재체질립(pGenesil).G418사선양성세포,획득은정전염적양성극륭.채용면역조화、Western blot급반정량역전록-취합매련반응(RT-PCR)검측불동조MG-63골육류세포중Snail표체;체외세포운동실험급중조세포기저막(Matrigel)침습실험료해세포전이잠능적개변;이새서람(MTT)비색법화극륭형성실험관찰세포증식.결과:MG-63세포내Snail표체명현,전염반의Snail질립후,Snail표체명현피억제.Snail표체하강적동시반수착체외세포증식、점부화침습력적억제.결론:골육류세포중존재Snail단백급mRNA적고표체,억제Snail mRNA적표체대골육류세포적침습、운동화증식유억제작용,가능위골육류적기인치료제공신적파점.