CAJ | 학술논문

髓样分化因子(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)是Toll/IL-1R家族成员,是TLR信号通路中的一个关键接头分子,在天然免疫系统中具有重要作用.迄今,在重要海水养殖鱼类半滑舌鳎中尚未见有关MyD88的研究报道.本研究克隆了半滑舌鳎(Gynoglossus semilaevis)MyD88基因,并对其表达模式进行了初步研究.半滑舌鳎MyD88基因的cDNA全长为1 612 bp,其中包括132 bp的5'非翻译区(UTR),590 bp的3'UTR和编码285个氨基酸残基的858 bp的开放阅读框(ORF).MyD88蛋白在N端具有死亡结构域(Death Domain,DD),C端具有TIR结构域(Toll/IL-1 Receptor Domain,TIR),MyD88基因组全长为2 923 bp,包括5个外显子和4个内含子.系统进化树分析表明,半滑舌鳎MyD88和牙鲆聚在一起,具有最近的亲缘关系.实时定量PCR结果显示,MyD88基因几乎在所有组织中都有表达,在血液、脾脏、头肾、肝脏等免疫组织和精巢、卵巢生殖腺中具有较高水平的表达.利用LPS(lipopolysaccharide)、PGN(peptidoglycan)和poly I:C作为免疫刺激源感染半滑舌鳎外周血淋巴细胞的结果显示,三者均可诱导MyD88基因的表达上调.鳗弧菌(Vibrio angaillarum)感染实验表明,注射鳗弧菌96h后MyD88基因在脾脏中表达量升高了近180倍、在肝脏中的表达量升高了60多倍;在注射鳗弧菌48 h后,头肾中表达量升高了近5倍.上述实验暗示,MyD88基因在半滑舌鳎天然免疫防御系统中具有重要作用.
수양분화인자(Myeloid differentiation factor 88,MyD88)시Toll/IL-1R가족성원,시TLR신호통로중적일개관건접두분자,재천연면역계통중구유중요작용.흘금,재중요해수양식어류반활설탑중상미견유관MyD88적연구보도.본연구극륭료반활설탑(Gynoglossus semilaevis)MyD88기인,병대기표체모식진행료초보연구.반활설탑MyD88기인적cDNA전장위1 612 bp,기중포괄132 bp적5'비번역구(UTR),590 bp적3'UTR화편마285개안기산잔기적858 bp적개방열독광(ORF).MyD88단백재N단구유사망결구역(Death Domain,DD),C단구유TIR결구역(Toll/IL-1 Receptor Domain,TIR),MyD88기인조전장위2 923 bp,포괄5개외현자화4개내함자.계통진화수분석표명,반활설탑MyD88화아평취재일기,구유최근적친연관계.실시정량PCR결과현시,MyD88기인궤호재소유조직중도유표체,재혈액、비장、두신、간장등면역조직화정소、란소생식선중구유교고수평적표체.이용LPS(lipopolysaccharide)、PGN(peptidoglycan)화poly I:C작위면역자격원감염반활설탑외주혈림파세포적결과현시,삼자균가유도MyD88기인적표체상조.만호균(Vibrio angaillarum)감염실험표명,주사만호균96h후MyD88기인재비장중표체량승고료근180배、재간장중적표체량승고료60다배;재주사만호균48 h후,두신중표체량승고료근5배.상술실험암시,MyD88기인재반활설탑천연면역방어계통중구유중요작용.