CAJ | 학술논문

建立相对简单经济的检测HLA-A*0201等位基因的方法,以便于从特定人群中快速筛选HLA-A*0201阳性的个体,满足科研的需要.根据第十二届HLA国际联合会提供的标准操作规程和一对HLA-A位点特异性的引物,从外周血中提取基因组DNA,扩增HLA-A基因;再设计两对HLA-A2组特异性引物,采用套式PCR分别扩增HLA-A基因的5'端和3'端,如出现特异条带,则将后两对引物的PCR产物进行测序分析,对照HLA-A2组等位基因的第2和第3外显子序列图,确定是否为HLA-A*02011～02016的6个等位基因.结果:以HLA-A*0201阳性的T2细胞株为阳性对照进行检测,结果完全正确,并设立非HLA-A*0201的A2细胞株RML(HLA-A*0204)及Raii细胞株(非A2组)为对照,同时随机检测30份门诊病人血样,其中7份为HLA-A2阳性,经测序,2例为HLA-A*02011,1例为HLA-A*0211或0235,1例是HLA-A*0206或0221或0241或0244或0251或0254,1例是HLA-A*0205或0214,1例是HLA-A*0234或0235,1例是0250.本方法利用位点特异性引物进行2～3次PCR扩增,结合PCR产物测序便可相对简便经济地检测出HLA-A*0201的全部6个亚等位基因,为快速检测其他特定HLA等位基因提供了经济实用的模式.
건립상대간단경제적검측HLA-A*0201등위기인적방법,이편우종특정인군중쾌속사선HLA-A*0201양성적개체,만족과연적수요.근거제십이계HLA국제연합회제공적표준조작규정화일대HLA-A위점특이성적인물,종외주혈중제취기인조DNA,확증HLA-A기인;재설계량대HLA-A2조특이성인물,채용투식PCR분별확증HLA-A기인적5'단화3'단,여출현특이조대,칙장후량대인물적PCR산물진행측서분석,대조HLA-A2조등위기인적제2화제3외현자서렬도,학정시부위HLA-A*02011～02016적6개등위기인.결과:이HLA-A*0201양성적T2세포주위양성대조진행검측,결과완전정학,병설립비HLA-A*0201적A2세포주RML(HLA-A*0204)급Raii세포주(비A2조)위대조,동시수궤검측30빈문진병인혈양,기중7빈위HLA-A2양성,경측서,2례위HLA-A*02011,1례위HLA-A*0211혹0235,1례시HLA-A*0206혹0221혹0241혹0244혹0251혹0254,1례시HLA-A*0205혹0214,1례시HLA-A*0234혹0235,1례시0250.본방법이용위점특이성인물진행2～3차PCR확증,결합PCR산물측서편가상대간편경제지검측출HLA-A*0201적전부6개아등위기인,위쾌속검측기타특정HLA등위기인제공료경제실용적모식.