生物技术
生物技術
생물기술
BIOTECHNOLOGY
2006年
4期
57-62
,共6页
黄华%苟斌全%王永红%储炬%庄英萍%张嗣良%袁中一
黃華%茍斌全%王永紅%儲炬%莊英萍%張嗣良%袁中一
황화%구빈전%왕영홍%저거%장영평%장사량%원중일
青霉素G酰化酶%组成型表达系统%质粒稳定性%葡萄糖
青黴素G酰化酶%組成型錶達繫統%質粒穩定性%葡萄糖
청매소G선화매%조성형표체계통%질립은정성%포도당
目的:对重组大肠杆菌组成型表达粪产碱杆菌青霉素G酰化酶(AfPGA)进行了发酵条件研究.方法:在摇瓶和5L发酵罐中研究了(NH4)2SO4和葡萄糖浓度对质粒的分离稳定性及青霉素G酰化酶表达的影响.结果:该工程菌质粒具有分离不稳定性,培养基中无(NH4)2SO4时发酵过程中pH和糊精水解生成葡萄糖的浓度变化较小,细胞前期(0h-12h)的生长速率降低,质粒分离稳定性和青霉素G酰化酶的表达水平提高.发酵过程中维持低葡萄糖水平可以限制细胞的生长速率,提高质粒稳定性和促进青霉素G酰化酶的合成.采用混合碳源发酵,发酵培养基含糊精2g/L,12h后以1g/L·h恒速流加葡萄糖至35h,控制流加过程葡萄糖浓度0.1g/L左右,平均比生长速率为0.06h-1,发酵结束时质粒稳定性为86%,青霉素G酰化酶的表达水平达23 000U/L.结论:重组大肠杆菌组成型表达青霉素G酰化酶的研究对工业生产有一定指导意义.
目的:對重組大腸桿菌組成型錶達糞產堿桿菌青黴素G酰化酶(AfPGA)進行瞭髮酵條件研究.方法:在搖瓶和5L髮酵罐中研究瞭(NH4)2SO4和葡萄糖濃度對質粒的分離穩定性及青黴素G酰化酶錶達的影響.結果:該工程菌質粒具有分離不穩定性,培養基中無(NH4)2SO4時髮酵過程中pH和糊精水解生成葡萄糖的濃度變化較小,細胞前期(0h-12h)的生長速率降低,質粒分離穩定性和青黴素G酰化酶的錶達水平提高.髮酵過程中維持低葡萄糖水平可以限製細胞的生長速率,提高質粒穩定性和促進青黴素G酰化酶的閤成.採用混閤碳源髮酵,髮酵培養基含糊精2g/L,12h後以1g/L·h恆速流加葡萄糖至35h,控製流加過程葡萄糖濃度0.1g/L左右,平均比生長速率為0.06h-1,髮酵結束時質粒穩定性為86%,青黴素G酰化酶的錶達水平達23 000U/L.結論:重組大腸桿菌組成型錶達青黴素G酰化酶的研究對工業生產有一定指導意義.
목적:대중조대장간균조성형표체분산감간균청매소G선화매(AfPGA)진행료발효조건연구.방법:재요병화5L발효관중연구료(NH4)2SO4화포도당농도대질립적분리은정성급청매소G선화매표체적영향.결과:해공정균질립구유분리불은정성,배양기중무(NH4)2SO4시발효과정중pH화호정수해생성포도당적농도변화교소,세포전기(0h-12h)적생장속솔강저,질립분리은정성화청매소G선화매적표체수평제고.발효과정중유지저포도당수평가이한제세포적생장속솔,제고질립은정성화촉진청매소G선화매적합성.채용혼합탄원발효,발효배양기함호정2g/L,12h후이1g/L·h항속류가포도당지35h,공제류가과정포도당농도0.1g/L좌우,평균비생장속솔위0.06h-1,발효결속시질립은정성위86%,청매소G선화매적표체수평체23 000U/L.결론:중조대장간균조성형표체청매소G선화매적연구대공업생산유일정지도의의.
