普通变形杆菌TWN-3株基因组文库构建及免疫印迹筛选
보통변형간균TWN-3주기인조문고구건급면역인적사선
Construction and Immunoscreening of Proteus vulgaris TWN-3 strain Genomic Library
  • 万方数据
    淡水渔业 담수어업
    FRESHWATER FISHERIES
    2007年 2期 12-15 ,共4页

    张涛%丁洁%张黎%刘莉%曹海军%王娟%顾继锐%伍翠芳%吴江%徐恒

    장도%정길%장려%류리%조해군%왕연%고계예%오취방%오강%서항

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    보통변형간균(Proteus vulgaris)%기인조문고%면역인적
    在从患病大口鲇中分离到普通变形杆菌TWN-3株的基础上,将该菌总DNA用EcoRI不完全酶切后,分离5kb左右的片段,连接入pUC18质粒,转化E.coli BL21,构建基因组文库,得到3.6×103个重组子,远大于理论计算的1 831个重组子,随机挑选重组子经EcoRI酶切鉴定重组率为100%,文库构建成功;将该菌裂解液与佐剂混合,免疫雄性新西兰大白兔,免疫程序结束后,抽血并分离血清,对用异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导后的文库进行免疫印迹筛选,最终得到8个阳性克隆子.本实验为该菌的DNA疫苗以及重要基因表达研究打下基础.
    재종환병대구점중분리도보통변형간균TWN-3주적기출상,장해균총DNA용EcoRI불완전매절후,분리5kb좌우적편단,련접입pUC18질립,전화E.coli BL21,구건기인조문고,득도3.6×103개중조자,원대우이론계산적1 831개중조자,수궤도선중조자경EcoRI매절감정중조솔위100%,문고구건성공;장해균렬해액여좌제혼합,면역웅성신서란대백토,면역정서결속후,추혈병분리혈청,대용이병기-β-D-류대반유당감(IPTG)유도후적문고진행면역인적사선,최종득도8개양성극륭자.본실험위해균적DNA역묘이급중요기인표체연구타하기출.
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