食品与药品
食品與藥品
식품여약품
FOOD AND DRUG
2008年
4期
5-7
,共3页
傅文彬%熊可强%阚梦元%赵健%李素霞%姬胜利%袁勤生
傅文彬%熊可彊%闞夢元%趙健%李素霞%姬勝利%袁勤生
부문빈%웅가강%감몽원%조건%리소하%희성리%원근생
肝素酶I%克隆%基因表达%酶活性
肝素酶I%剋隆%基因錶達%酶活性
간소매I%극륭%기인표체%매활성
目的 克隆并表达黄杆菌肝素酶I(HepI)基因.方法 通过PCR从黄杆菌基因组DNA中扩增黄杆菌HepI基因,验证后插入到表达质粒Pet-22b中构建表达载体,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3)进行蛋白质表达,并用Azure A法测定酶活性.结果 PCR扩增得到序列正确的HepI基因,并将该基因成功插入到Pet-22b表达载体中.重组质粒转入E.coli BL21(DE3)后表达的蛋白质经SDS.PAGE分析,与目的蛋白质的相对分子质量基本一致,其活性约为50 U/LA600.结论 克隆并成功表达了黄杆菌HepI基因.
目的 剋隆併錶達黃桿菌肝素酶I(HepI)基因.方法 通過PCR從黃桿菌基因組DNA中擴增黃桿菌HepI基因,驗證後插入到錶達質粒Pet-22b中構建錶達載體,重組質粒轉化大腸桿菌BL21(DE3)進行蛋白質錶達,併用Azure A法測定酶活性.結果 PCR擴增得到序列正確的HepI基因,併將該基因成功插入到Pet-22b錶達載體中.重組質粒轉入E.coli BL21(DE3)後錶達的蛋白質經SDS.PAGE分析,與目的蛋白質的相對分子質量基本一緻,其活性約為50 U/LA600.結論 剋隆併成功錶達瞭黃桿菌HepI基因.
목적 극륭병표체황간균간소매I(HepI)기인.방법 통과PCR종황간균기인조DNA중확증황간균HepI기인,험증후삽입도표체질립Pet-22b중구건표체재체,중조질립전화대장간균BL21(DE3)진행단백질표체,병용Azure A법측정매활성.결과 PCR확증득도서렬정학적HepI기인,병장해기인성공삽입도Pet-22b표체재체중.중조질립전입E.coli BL21(DE3)후표체적단백질경SDS.PAGE분석,여목적단백질적상대분자질량기본일치,기활성약위50 U/LA600.결론 극륭병성공표체료황간균HepI기인.
