厦门大学学报（自然科学版）
廈門大學學報（自然科學版）
하문대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF XIAMEN UNIVERSITY (NATURAL SCIENCE)
2009年
5期
617-622
,共6页
杂色鲍%抗冻肽%启动子%载体构建
雜色鮑%抗凍肽%啟動子%載體構建
잡색포%항동태%계동자%재체구건
现代转基因技术是一种快速改良品种特性的有效方法.采用转基因技术提高我国南方重要贝类经济养殖品种--杂色鲍的耐低温特性是扩大其养殖范围的重要手段.以pIRES2-EGFP为基本载体,以合成并经过功能鉴定的抗冻肽(AFP)和杂色鲍肌动蛋白启动子(HdiActinP)为插入元件,首先用限制性内切酶BamHⅠ和 EcoRⅠ对基本载体pIRES2-EGFP和AFP-Ⅲ进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接得到载体pIRES2-EGFP-AFP.随后利用限制性内切酶SacⅠ和 EcoRⅠ对载体pIRES2-EGFP-AFP和HdiActinP进行双酶切,目的酶切产物被回收后再连接最终得到杂色鲍转AFP-Ⅲ的表达载体pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP,经过聚合酶链式反应和测序验证证明载体构建成功.
現代轉基因技術是一種快速改良品種特性的有效方法.採用轉基因技術提高我國南方重要貝類經濟養殖品種--雜色鮑的耐低溫特性是擴大其養殖範圍的重要手段.以pIRES2-EGFP為基本載體,以閤成併經過功能鑒定的抗凍肽(AFP)和雜色鮑肌動蛋白啟動子(HdiActinP)為插入元件,首先用限製性內切酶BamHⅠ和 EcoRⅠ對基本載體pIRES2-EGFP和AFP-Ⅲ進行雙酶切,目的酶切產物被迴收後再連接得到載體pIRES2-EGFP-AFP.隨後利用限製性內切酶SacⅠ和 EcoRⅠ對載體pIRES2-EGFP-AFP和HdiActinP進行雙酶切,目的酶切產物被迴收後再連接最終得到雜色鮑轉AFP-Ⅲ的錶達載體pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP,經過聚閤酶鏈式反應和測序驗證證明載體構建成功.
현대전기인기술시일충쾌속개량품충특성적유효방법.채용전기인기술제고아국남방중요패류경제양식품충--잡색포적내저온특성시확대기양식범위적중요수단.이pIRES2-EGFP위기본재체,이합성병경과공능감정적항동태(AFP)화잡색포기동단백계동자(HdiActinP)위삽입원건,수선용한제성내절매BamHⅠ화 EcoRⅠ대기본재체pIRES2-EGFP화AFP-Ⅲ진행쌍매절,목적매절산물피회수후재련접득도재체pIRES2-EGFP-AFP.수후이용한제성내절매SacⅠ화 EcoRⅠ대재체pIRES2-EGFP-AFP화HdiActinP진행쌍매절,목적매절산물피회수후재련접최종득도잡색포전AFP-Ⅲ적표체재체pIRES2-EGFP-AFP-HdiActinP,경과취합매련식반응화측서험증증명재체구건성공.
