CAJ | 학술논문

目的观察11,12-环氧二十碳三烯酸(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EET)对缺氧/复氧诱导的内皮细胞损伤以及黏附分子表达的影响,了解环氧二十碳三烯酸发挥血管保护作用的可能途径,初步探讨其作用机制.方法采用原代培养人脐静脉内皮细胞,用数字表法将其随机分为对照组、11,12-EET对照组、缺氧/复氧组和11,12-EET缺氧/复氧组.通过向培养瓶内通入混合气体(2% O2,5% CO2,93% N2)3 h,复氧1 h,复制缺氧/复氧损伤模型.采用MTT法检测细胞活力,用比色法检测培养液中超氧化物歧化酶(SOD)及丙二醛(MDA)的变化,用RT-PCR法检测细胞间黏附分子-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA表达,用酶联免疫吸附实验测定细胞间黏附分子-1蛋白表达,用Western blotting方法检测蛋白激酶B(Akt).结果 11,12-EET在常氧条件下可对细胞造成轻度损伤,在缺氧/复氧条件下能显著提高内皮细胞的存活率,提高SOD的活性,降低MDA的含量,抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达,提高Akt的表达.结论 11,12-EET具有减轻内皮细胞缺氧/复氧损伤作用,这可能与其能提高缺氧/复氧条件下内皮细胞SOD活性、清除氧自由基、抑制细胞间黏附分子-1 mRNA和蛋白的表达和促进Akt的表达有关.
목적 관찰11,12-배양이십탄삼희산(11,12-epoxyeicosatrienoic acids,11,12-EET)대결양/복양유도적내피세포손상이급점부분자표체적영향,료해배양이십탄삼희산발휘혈관보호작용적가능도경,초보탐토기작용궤제.방법 채용원대배양인제정맥내피세포,용수자표법장기수궤분위대조조、11,12-EET대조조、결양/복양조화11,12-EET결양/복양조.통과향배양병내통입혼합기체(2% O2,5% CO2,93% N2)3 h,복양1 h,복제결양/복양손상모형.채용MTT법검측세포활력,용비색법검측배양액중초양화물기화매(SOD)급병이철(MDA)적변화,용RT-PCR법검측세포간점부분자-1(intercellular adhesion molecule-1,ICAM-1)mRNA표체,용매련면역흡부실험측정세포간점부분자-1단백표체,용Western blotting방법검측단백격매B(Akt).결과 11,12-EET재상양조건하가대세포조성경도손상,재결양/복양조건하능현저제고내피세포적존활솔,제고SOD적활성,강저MDA적함량,억제세포간점부분자-1 mRNA화단백적표체,제고Akt적표체.결론 11,12-EET구유감경내피세포결양/복양손상작용,저가능여기능제고결양/복양조건하내피세포SOD활성、청제양자유기、억제세포간점부분자-1 mRNA화단백적표체화촉진Akt적표체유관.