中国优生与遗传杂志
中國優生與遺傳雜誌
중국우생여유전잡지
CHINESE JOURNAL OF BIRTH HEALTH AND HEREDITY
2004年
5期
1-4
,共4页
郝麟%朱平%于晓梅%张大成%赵新生%欧阳贱华
郝麟%硃平%于曉梅%張大成%趙新生%歐暘賤華
학린%주평%우효매%장대성%조신생%구양천화
PCR基因芯片%荧光PCR反应%Taqman探针%荧光染料
PCR基因芯片%熒光PCR反應%Taqman探針%熒光染料
PCR기인심편%형광PCR반응%Taqman탐침%형광염료
目的探讨能否在基因芯片上进行不同的荧光掺入PCR反应并根据基因芯片上荧光的变化判断基因的变异.方法利用健康外周血,正常脐血DNA,X连锁遗传性铁粒幼细胞贫血(XLSA)家系成员6人外周血DNA做PCR-SSCP,并测序确定.设计检测此点突变的Taqman探针进行荧光PCR反应,在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.利用4步位点特异PCR结合SYBR荧光染料初筛HLAA2,并在芯片上进行同样的反应,与上述反应结果进行对照.结果PCR-SSCP分析与测序确定X连锁遗传性铁幼粒细胞贫血家系两患者的ALAS2基因第5外显子有G514A点突变,母亲、外祖母为杂合子携带者.设计Taqman探针时此家系中六位成员DNA与二份正常男性脐血DNA检测与预期结果相符.将上述结果中同样的样本移入芯片进行PCR反应,结果与常规荧光PCR反应的结果一致.SYBR荧光染料PCR反应与芯片上SYBR荧光染料PCR反应的结果与预期完全相符.结论利用TaqMan探针与SYBR Green荧光染料可以在PCR基因芯片上顺利进行PCR反应,根据基因芯片上荧光的变化检测出点突变与单核苷酸多态性.为基因芯片的临床应用打下了基础.
目的探討能否在基因芯片上進行不同的熒光摻入PCR反應併根據基因芯片上熒光的變化判斷基因的變異.方法利用健康外週血,正常臍血DNA,X連鎖遺傳性鐵粒幼細胞貧血(XLSA)傢繫成員6人外週血DNA做PCR-SSCP,併測序確定.設計檢測此點突變的Taqman探針進行熒光PCR反應,在芯片上進行同樣的反應,與上述反應結果進行對照.利用4步位點特異PCR結閤SYBR熒光染料初篩HLAA2,併在芯片上進行同樣的反應,與上述反應結果進行對照.結果PCR-SSCP分析與測序確定X連鎖遺傳性鐵幼粒細胞貧血傢繫兩患者的ALAS2基因第5外顯子有G514A點突變,母親、外祖母為雜閤子攜帶者.設計Taqman探針時此傢繫中六位成員DNA與二份正常男性臍血DNA檢測與預期結果相符.將上述結果中同樣的樣本移入芯片進行PCR反應,結果與常規熒光PCR反應的結果一緻.SYBR熒光染料PCR反應與芯片上SYBR熒光染料PCR反應的結果與預期完全相符.結論利用TaqMan探針與SYBR Green熒光染料可以在PCR基因芯片上順利進行PCR反應,根據基因芯片上熒光的變化檢測齣點突變與單覈苷痠多態性.為基因芯片的臨床應用打下瞭基礎.
목적탐토능부재기인심편상진행불동적형광참입PCR반응병근거기인심편상형광적변화판단기인적변이.방법이용건강외주혈,정상제혈DNA,X련쇄유전성철립유세포빈혈(XLSA)가계성원6인외주혈DNA주PCR-SSCP,병측서학정.설계검측차점돌변적Taqman탐침진행형광PCR반응,재심편상진행동양적반응,여상술반응결과진행대조.이용4보위점특이PCR결합SYBR형광염료초사HLAA2,병재심편상진행동양적반응,여상술반응결과진행대조.결과PCR-SSCP분석여측서학정X련쇄유전성철유립세포빈혈가계량환자적ALAS2기인제5외현자유G514A점돌변,모친、외조모위잡합자휴대자.설계Taqman탐침시차가계중육위성원DNA여이빈정상남성제혈DNA검측여예기결과상부.장상술결과중동양적양본이입심편진행PCR반응,결과여상규형광PCR반응적결과일치.SYBR형광염료PCR반응여심편상SYBR형광염료PCR반응적결과여예기완전상부.결론이용TaqMan탐침여SYBR Green형광염료가이재PCR기인심편상순리진행PCR반응,근거기인심편상형광적변화검측출점돌변여단핵감산다태성.위기인심편적림상응용타하료기출.
