安徽农业科学
安徽農業科學
안휘농업과학
JOURNAL OF ANHUI AGRICULTURAL SCIENCES
2008年
21期
8943-8945
,共3页
王天祥%严晓丹%贾文锁%王华芳
王天祥%嚴曉丹%賈文鎖%王華芳
왕천상%엄효단%가문쇄%왕화방
DREB2B%载体构建%基因克隆%不完全酶切
DREB2B%載體構建%基因剋隆%不完全酶切
DREB2B%재체구건%기인극륭%불완전매절
[目的]获得耐旱转录因子的植物表达载体,进而转化植物获得耐旱性提高的新植物株系.[方法]提取脱水处理的拟南芥总RNA,利用AtDREB2B特异引物通过RT-PCR扩增出1.2 kb片段,并将其克隆至pBS-T上,测序.[结果]序列分析表明,该克隆序列与GenBank上登录AtDREB2B基因序列的一致性为100%.进一步通过片段的亚克隆,将其构建至植物表达栽体pCAMBIA 1301和pBin438上,分别由td29A启动子和重复35 S启动子调控基因表达.[结论]成功构建了2种AtDREB2B的植物表达载体,并通过冻融法转化根癌农杆菌GV3101,为农杆菌介导的AtDREB2B基因对植物的遗传转化奠定基础.
[目的]穫得耐旱轉錄因子的植物錶達載體,進而轉化植物穫得耐旱性提高的新植物株繫.[方法]提取脫水處理的擬南芥總RNA,利用AtDREB2B特異引物通過RT-PCR擴增齣1.2 kb片段,併將其剋隆至pBS-T上,測序.[結果]序列分析錶明,該剋隆序列與GenBank上登錄AtDREB2B基因序列的一緻性為100%.進一步通過片段的亞剋隆,將其構建至植物錶達栽體pCAMBIA 1301和pBin438上,分彆由td29A啟動子和重複35 S啟動子調控基因錶達.[結論]成功構建瞭2種AtDREB2B的植物錶達載體,併通過凍融法轉化根癌農桿菌GV3101,為農桿菌介導的AtDREB2B基因對植物的遺傳轉化奠定基礎.
[목적]획득내한전록인자적식물표체재체,진이전화식물획득내한성제고적신식물주계.[방법]제취탈수처리적의남개총RNA,이용AtDREB2B특이인물통과RT-PCR확증출1.2 kb편단,병장기극륭지pBS-T상,측서.[결과]서렬분석표명,해극륭서렬여GenBank상등록AtDREB2B기인서렬적일치성위100%.진일보통과편단적아극륭,장기구건지식물표체재체pCAMBIA 1301화pBin438상,분별유td29A계동자화중복35 S계동자조공기인표체.[결론]성공구건료2충AtDREB2B적식물표체재체,병통과동융법전화근암농간균GV3101,위농간균개도적AtDREB2B기인대식물적유전전화전정기출.
