河北农业大学学报
河北農業大學學報
하북농업대학학보
JOURNAL OF AGRICULTURAL UNIVERSITY OF HEBEI
2008年
5期
85-88
,共4页
陈赛娟%刘涛%曹洪战%张斌%付新城%张丽青%孙继国
陳賽娟%劉濤%曹洪戰%張斌%付新城%張麗青%孫繼國
진새연%류도%조홍전%장빈%부신성%장려청%손계국
猪繁殖与呼吸综合征病毒%N基因%序列分析%原核表达
豬繁殖與呼吸綜閤徵病毒%N基因%序列分析%原覈錶達
저번식여호흡종합정병독%N기인%서렬분석%원핵표체
为了给河北地区预防和控制猪繁殖与呼吸综合征提供理论数据.应用RT-PCR方法特异性扩增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,将扩增片段克隆入pMD-T载体后测序,应用DNAstar分析软件对序列进行分析,并与GenBank中发表的PRRSV毒株序列进行比较.结果显示:HB-3(cz)株与高热病毒株JXAl、HUB2等及传统河北分离株HB-1(sh)氨基酸同源性高达97.6%,属美洲型毒株.将目的片段克隆入原核表达载体pGEX-6P-1,重组质粒pGEX-N转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下成功获得表达,经Western-blotting分析表明:表达的融合蛋白分子量约为39.5 kDa,能与PRRSV的阳性血清发生特异性反应,为PRRSV血清学诊断方法的建立奠定了基础.
為瞭給河北地區預防和控製豬繁殖與呼吸綜閤徵提供理論數據.應用RT-PCR方法特異性擴增HB-3(cz)株的ORF7(N)基因片段,將擴增片段剋隆入pMD-T載體後測序,應用DNAstar分析軟件對序列進行分析,併與GenBank中髮錶的PRRSV毒株序列進行比較.結果顯示:HB-3(cz)株與高熱病毒株JXAl、HUB2等及傳統河北分離株HB-1(sh)氨基痠同源性高達97.6%,屬美洲型毒株.將目的片段剋隆入原覈錶達載體pGEX-6P-1,重組質粒pGEX-N轉化大腸桿菌BL21(DE3),在IPTG誘導下成功穫得錶達,經Western-blotting分析錶明:錶達的融閤蛋白分子量約為39.5 kDa,能與PRRSV的暘性血清髮生特異性反應,為PRRSV血清學診斷方法的建立奠定瞭基礎.
위료급하북지구예방화공제저번식여호흡종합정제공이론수거.응용RT-PCR방법특이성확증HB-3(cz)주적ORF7(N)기인편단,장확증편단극륭입pMD-T재체후측서,응용DNAstar분석연건대서렬진행분석,병여GenBank중발표적PRRSV독주서렬진행비교.결과현시:HB-3(cz)주여고열병독주JXAl、HUB2등급전통하북분리주HB-1(sh)안기산동원성고체97.6%,속미주형독주.장목적편단극륭입원핵표체재체pGEX-6P-1,중조질립pGEX-N전화대장간균BL21(DE3),재IPTG유도하성공획득표체,경Western-blotting분석표명:표체적융합단백분자량약위39.5 kDa,능여PRRSV적양성혈청발생특이성반응,위PRRSV혈청학진단방법적건립전정료기출.
