动物学杂志
動物學雜誌
동물학잡지
CHINESE JOURNAL OF ZOOLOGY
2009年
1期
17-23
,共7页
海萨%李家乐%刘峰%冯建彬
海薩%李傢樂%劉峰%馮建彬
해살%리가악%류봉%풍건빈
伊犁鲈%河鲈%黄金鲈%微卫星标记%磁珠富集法
伊犛鱸%河鱸%黃金鱸%微衛星標記%磁珠富集法
이리로%하로%황금로%미위성표기%자주부집법
为开发伊犁鲈(Perca schrenkii)分子标记用于鲈属鱼类种质资源保护,以伊犁鲈为材料,应用磁珠富集法进行了微卫星标记的筛选.从伊犁鲈尾鳍提取总DNA,进行酶切、接头连接、PCR扩增,再采用生物素标记(CA)15探针及生物素标记(TG)15探针对扩增产物进行杂交富集,经再次PCR扩增及T-A克隆,成功构建了伊犁鲈基因组微卫星富集文库.采用重复序列引物筛选获得阳性克隆,随机选取48个阳性克隆进行测序,测得序列46个,其中38个克隆含有微卫星序列,41个位点的微卫星重复数在8次以上.根据测得序列设计17对微卫星引物,均能在伊犁鲈群体中扩增获得目的条带.采用该17对引物对河鲈(P.fluviatilis)及黄金鲈(P.flavescens)群体样本进行扩增,10对引物具有通用性,其中6对在河鲈中具有高度多态性(PIC>0.5),5对在黄金鲈中具有高度多态性.
為開髮伊犛鱸(Perca schrenkii)分子標記用于鱸屬魚類種質資源保護,以伊犛鱸為材料,應用磁珠富集法進行瞭微衛星標記的篩選.從伊犛鱸尾鰭提取總DNA,進行酶切、接頭連接、PCR擴增,再採用生物素標記(CA)15探針及生物素標記(TG)15探針對擴增產物進行雜交富集,經再次PCR擴增及T-A剋隆,成功構建瞭伊犛鱸基因組微衛星富集文庫.採用重複序列引物篩選穫得暘性剋隆,隨機選取48箇暘性剋隆進行測序,測得序列46箇,其中38箇剋隆含有微衛星序列,41箇位點的微衛星重複數在8次以上.根據測得序列設計17對微衛星引物,均能在伊犛鱸群體中擴增穫得目的條帶.採用該17對引物對河鱸(P.fluviatilis)及黃金鱸(P.flavescens)群體樣本進行擴增,10對引物具有通用性,其中6對在河鱸中具有高度多態性(PIC>0.5),5對在黃金鱸中具有高度多態性.
위개발이리로(Perca schrenkii)분자표기용우로속어류충질자원보호,이이리로위재료,응용자주부집법진행료미위성표기적사선.종이리로미기제취총DNA,진행매절、접두련접、PCR확증,재채용생물소표기(CA)15탐침급생물소표기(TG)15탐침대확증산물진행잡교부집,경재차PCR확증급T-A극륭,성공구건료이리로기인조미위성부집문고.채용중복서렬인물사선획득양성극륭,수궤선취48개양성극륭진행측서,측득서렬46개,기중38개극륭함유미위성서렬,41개위점적미위성중복수재8차이상.근거측득서렬설계17대미위성인물,균능재이리로군체중확증획득목적조대.채용해17대인물대하로(P.fluviatilis)급황금로(P.flavescens)군체양본진행확증,10대인물구유통용성,기중6대재하로중구유고도다태성(PIC>0.5),5대재황금로중구유고도다태성.
