分析化学
分析化學
분석화학
CHINESE JOURNAL OF ANALYTICAL CHEMISTRY
2008年
12期
1667-1671
,共5页
李永新%黎源倩%渠凌丽%何成艳
李永新%黎源倩%渠凌麗%何成豔
리영신%려원천%거릉려%하성염
微流控芯片%激光诱导荧光检测%食源性致病菌%多重聚合酶链反应
微流控芯片%激光誘導熒光檢測%食源性緻病菌%多重聚閤酶鏈反應
미류공심편%격광유도형광검측%식원성치병균%다중취합매련반응
建立了食品中4种常见食源性致病菌的微流控芯片快速检测方法.根据副溶血弧菌的Vpara(16S-23s rDNA IGs)基因、沙门菌的 invA 基因、大肠杆菌 0157:H7 的 rfb0157 基因和志贺菌的 ipaH 基因序列设计了4对特异性引物,对上述致病菌进行四重 PCR 扩增,采用微流控芯片-激光诱导荧光检测食品中4种常见致病菌的多重 PCR 扩增产物.优化了多重 PCR 扩增和微流控芯片电泳分离的实验条件.当芯片电泳的筛分介质 HPMC-50 浓度为2.2%、溴乙锭(EB)含量为3.75μmoL/L、电场强度为120 V/cm 时,pUC Mix DNA Marker-8和待测致病菌的多重PCR扩增产物可以实现基线分离,600 s内即可完成上述4种致病菌的同时检测,迁移时间的日内相对标准偏差为0.74%～2.09%.本方法能够检出1×102 cfu/mL的副溶血弧菌、沙门菌、大肠杆菌0157:H7和志贺菌.方法特异性高,所设计的引物在10种非目的菌株体系中均未见扩增的片段.将本法应用于食品中上述致病菌的测定,获得了满意的结果,为常见食源性致病菌的快速检测提供了一种新的可靠分析手段,对保障食品安全具有重要的现实意义.
建立瞭食品中4種常見食源性緻病菌的微流控芯片快速檢測方法.根據副溶血弧菌的Vpara(16S-23s rDNA IGs)基因、沙門菌的 invA 基因、大腸桿菌 0157:H7 的 rfb0157 基因和誌賀菌的 ipaH 基因序列設計瞭4對特異性引物,對上述緻病菌進行四重 PCR 擴增,採用微流控芯片-激光誘導熒光檢測食品中4種常見緻病菌的多重 PCR 擴增產物.優化瞭多重 PCR 擴增和微流控芯片電泳分離的實驗條件.噹芯片電泳的篩分介質 HPMC-50 濃度為2.2%、溴乙錠(EB)含量為3.75μmoL/L、電場彊度為120 V/cm 時,pUC Mix DNA Marker-8和待測緻病菌的多重PCR擴增產物可以實現基線分離,600 s內即可完成上述4種緻病菌的同時檢測,遷移時間的日內相對標準偏差為0.74%～2.09%.本方法能夠檢齣1×102 cfu/mL的副溶血弧菌、沙門菌、大腸桿菌0157:H7和誌賀菌.方法特異性高,所設計的引物在10種非目的菌株體繫中均未見擴增的片段.將本法應用于食品中上述緻病菌的測定,穫得瞭滿意的結果,為常見食源性緻病菌的快速檢測提供瞭一種新的可靠分析手段,對保障食品安全具有重要的現實意義.
건립료식품중4충상견식원성치병균적미류공심편쾌속검측방법.근거부용혈호균적Vpara(16S-23s rDNA IGs)기인、사문균적 invA 기인、대장간균 0157:H7 적 rfb0157 기인화지하균적 ipaH 기인서렬설계료4대특이성인물,대상술치병균진행사중 PCR 확증,채용미류공심편-격광유도형광검측식품중4충상견치병균적다중 PCR 확증산물.우화료다중 PCR 확증화미류공심편전영분리적실험조건.당심편전영적사분개질 HPMC-50 농도위2.2%、추을정(EB)함량위3.75μmoL/L、전장강도위120 V/cm 시,pUC Mix DNA Marker-8화대측치병균적다중PCR확증산물가이실현기선분리,600 s내즉가완성상술4충치병균적동시검측,천이시간적일내상대표준편차위0.74%～2.09%.본방법능구검출1×102 cfu/mL적부용혈호균、사문균、대장간균0157:H7화지하균.방법특이성고,소설계적인물재10충비목적균주체계중균미견확증적편단.장본법응용우식품중상술치병균적측정,획득료만의적결과,위상견식원성치병균적쾌속검측제공료일충신적가고분석수단,대보장식품안전구유중요적현실의의.
