CAJ | 학술논문

背景:骨髓间充质干细胞易于被外源基因转染,且具有向损伤组织趋化聚集的特性,便于将目的基因导入其中并发挥治疗性作用,可以通过分化为血管内皮细胞修复损伤的血管内膜.目的:探讨慢病毒载体介导的血管牛长素1基因修饰骨髓间充质干细胞移植后,对大鼠颈动脉粥样硬化的影响.设计、时间及地点:随机对照动物实验,于2007-02/2008-05在福建省高血压研究所及福建医大附属第一医院中心实验室完成.材料:4周龄雄性SD大鼠32只,8只用于制备骨髓间充质干细胞,剩余24只随机分为3组;模型对照组、空载体组、血管生长素1转染组,8只/组.方法:以重组慢病毒为载体构建血管生长素1基因工程干细胞,以绿色荧光蛋白为报告基因,调整细胞密度为(1.0～2.0),1010 L-1.3组大鼠均采用球囊损伤法+高脂饮食构建颈动脉粥样硬化模型,造模后即刻,空载体组将未感染的0.1 mL骨髓间充质干细胞悬液注入颈总动脉外膜,分3点注射;血管生长素1转染组同法注入等量重组慢病毒感染的骨髓间充质干细胞悬液,饲养2个月后处死大鼠,取颈动脉组织.主要观察指标:Western blot法检测转基因干细胞中血管生长素1的表达,荧光免疫组织化学及苏木精-伊红染色检测动脉内膜/中膜面积比.结果:24只大鼠均进入结果分析.血管生长素1转染组表达血管生长素1蛋白,另2组无血管生长素1蛋白表达.移植后2个月,荧光显微镜下空载体组、血管生长素1转染组动脉壁内均可见绿色荧光蛋白阳性细胞;各组均可见动脉内膜增生,斑块形成;与模型对照组比较,空载体组内膜面积,中膜面积值无明显变化(P＞0.05),血管生长素1转染组内膜面积,中联面积值明显减小(P＜0.05).结论:经血管生长素1基因修饰的骨髓间充质干细胞移植可明显减轻动脉粥样硬化程度.
배경:골수간충질간세포역우피외원기인전염,차구유향손상조직추화취집적특성,편우장목적기인도입기중병발휘치료성작용,가이통과분화위혈관내피세포수복손상적혈관내막.목적:탐토만병독재체개도적혈관우장소1기인수식골수간충질간세포이식후,대대서경동맥죽양경화적영향.설계、시간급지점:수궤대조동물실험,우2007-02/2008-05재복건성고혈압연구소급복건의대부속제일의원중심실험실완성.재료:4주령웅성SD대서32지,8지용우제비골수간충질간세포,잉여24지수궤분위3조;모형대조조、공재체조、혈관생장소1전염조,8지/조.방법:이중조만병독위재체구건혈관생장소1기인공정간세포,이록색형광단백위보고기인,조정세포밀도위(1.0～2.0),1010 L-1.3조대서균채용구낭손상법+고지음식구건경동맥죽양경화모형,조모후즉각,공재체조장미감염적0.1 mL골수간충질간세포현액주입경총동맥외막,분3점주사;혈관생장소1전염조동법주입등량중조만병독감염적골수간충질간세포현액,사양2개월후처사대서,취경동맥조직.주요관찰지표:Western blot법검측전기인간세포중혈관생장소1적표체,형광면역조직화학급소목정-이홍염색검측동맥내막/중막면적비.결과:24지대서균진입결과분석.혈관생장소1전염조표체혈관생장소1단백,령2조무혈관생장소1단백표체.이식후2개월,형광현미경하공재체조、혈관생장소1전염조동맥벽내균가견록색형광단백양성세포;각조균가견동맥내막증생,반괴형성;여모형대조조비교,공재체조내막면적,중막면적치무명현변화(P＞0.05),혈관생장소1전염조내막면적,중련면적치명현감소(P＜0.05).결론:경혈관생장소1기인수식적골수간충질간세포이식가명현감경동맥죽양경화정도.