浙江医学
浙江醫學
절강의학
ZHEJIANG MEDICAL JOURNAL
2010年
9期
1372-1374,1407
,共4页
AQP5%腺病毒载体%干燥综合征
AQP5%腺病毒載體%榦燥綜閤徵
AQP5%선병독재체%간조종합정
目的 构建AQP5的重组腺病毒载体,并验证其在干燥综合征中的治疗作用.方法 采用RT-PCR方法扩增AQP5基因,经酶切插入穿梭质粒pAdTrack-CMV,形成重组质粒pAdTrack-CMV-AQP5.经Pmel酶切线性化后与pAdeasy-1同源重组,重组质粒pAdeasy-AQP5经Pacl酶切,经脂质体转染入HEK293细胞中包装获得病毒.经过体外检测确认病毒表达后,于NOD小鼠颌下腺周注射病毒,观察其对唾液分泌量的影响.结果 经PCR和测序证实重组pAdeasy-AQP5质粒构建成功.并可见其在293细胞中表达;初步实验研究发现,其能缓解NOD小鼠的唾液腺分泌功能异常.结论 成功构建了AQP5的重组腺病毒载体,初步证实了pAdeasy-AQP5在干燥综合征中的治疗作用.
目的 構建AQP5的重組腺病毒載體,併驗證其在榦燥綜閤徵中的治療作用.方法 採用RT-PCR方法擴增AQP5基因,經酶切插入穿梭質粒pAdTrack-CMV,形成重組質粒pAdTrack-CMV-AQP5.經Pmel酶切線性化後與pAdeasy-1同源重組,重組質粒pAdeasy-AQP5經Pacl酶切,經脂質體轉染入HEK293細胞中包裝穫得病毒.經過體外檢測確認病毒錶達後,于NOD小鼠頜下腺週註射病毒,觀察其對唾液分泌量的影響.結果 經PCR和測序證實重組pAdeasy-AQP5質粒構建成功.併可見其在293細胞中錶達;初步實驗研究髮現,其能緩解NOD小鼠的唾液腺分泌功能異常.結論 成功構建瞭AQP5的重組腺病毒載體,初步證實瞭pAdeasy-AQP5在榦燥綜閤徵中的治療作用.
목적 구건AQP5적중조선병독재체,병험증기재간조종합정중적치료작용.방법 채용RT-PCR방법확증AQP5기인,경매절삽입천사질립pAdTrack-CMV,형성중조질립pAdTrack-CMV-AQP5.경Pmel매절선성화후여pAdeasy-1동원중조,중조질립pAdeasy-AQP5경Pacl매절,경지질체전염입HEK293세포중포장획득병독.경과체외검측학인병독표체후,우NOD소서합하선주주사병독,관찰기대타액분비량적영향.결과 경PCR화측서증실중조pAdeasy-AQP5질립구건성공.병가견기재293세포중표체;초보실험연구발현,기능완해NOD소서적타액선분비공능이상.결론 성공구건료AQP5적중조선병독재체,초보증실료pAdeasy-AQP5재간조종합정중적치료작용.
