CAJ | 학술논문

[目的]研究NDV-HN蛋白抗原表位在动物免疫应答中的作用特点.[方法]根据HN基因和载体pGEX-4T-1的多克隆位点自行设计1对引物,以该实验室保存的重组质粒为模板,进行PCR扩增,再将其所得片段定向插入pGEX-4T-1,构建重组质粒,并对该重组质粒进行鉴定;再将构建的重组质粒在大肠杆菌中表达;最后,鉴定了相应单克隆抗体.[结果]PCR结果表明,得到了与预期结果一致的长度为850 bp的片段;重组质粒鉴定结果表明,成功构建了包含目的基因片段的重组表达质粒pGEX-4T-HN23;重组质粒经原核表达获得大小为57 kD的融合蛋白,免疫Balb/c小鼠试验表明,用免疫鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合,经ELISA筛选和3次亚克隆获得2株稳定传代(可传20代以上)和分泌抗NDV-HN抗体的杂交瘤细胞株.[结论]获得的鸡新城疫病毒HN单克隆抗体,为进一步研究HN在致病过程的作用及特异性诊断提供了重要试验材料.
[목적]연구NDV-HN단백항원표위재동물면역응답중적작용특점.[방법]근거HN기인화재체pGEX-4T-1적다극륭위점자행설계1대인물,이해실험실보존적중조질립위모판,진행PCR확증,재장기소득편단정향삽입pGEX-4T-1,구건중조질립,병대해중조질립진행감정;재장구건적중조질립재대장간균중표체;최후,감정료상응단극륭항체.[결과]PCR결과표명,득도료여예기결과일치적장도위850 bp적편단;중조질립감정결과표명,성공구건료포함목적기인편단적중조표체질립pGEX-4T-HN23;중조질립경원핵표체획득대소위57 kD적융합단백,면역Balb/c소서시험표명,용면역서비세포여골수류세포융합,경ELISA사선화3차아극륭획득2주은정전대(가전20대이상)화분비항NDV-HN항체적잡교류세포주.[결론]획득적계신성역병독HN단극륭항체,위진일보연구HN재치병과정적작용급특이성진단제공료중요시험재료.