山东医药
山東醫藥
산동의약
SHANDONG MEDICAL JOURNAL
2011年
40期
73-76
,共4页
张尤历%曹亮%徐岷%路筝%袁伟红%李兆申
張尤歷%曹亮%徐岷%路箏%袁偉紅%李兆申
장우력%조량%서민%로쟁%원위홍%리조신
髓样细胞表达激发受体-1%重组质粒%杆状病毒%融合蛋白
髓樣細胞錶達激髮受體-1%重組質粒%桿狀病毒%融閤蛋白
수양세포표체격발수체-1%중조질립%간상병독%융합단백
目的 构建大鼠髓样细胞表达激发受体-1(TREM-1)/人lgG融合蛋白的真核表达载体,并在家蚕Bm细胞中实现稳定表达.方法 克隆大鼠TREM-1胞外段与人1gGFe段,片段连接后PCR扩增,再与病毒穿梭载体BAC1连接,基因克降,构建重组质粒.利用]杆状病毒表达系统(Bac-to-Bac)筛选重组杆状病毒,在Bm细胞中进行融合表达,并用Western blot法行蛋白鉴定.结果 重组质粒酶切测序正确,确认克隆载体构建成功.Western blot结果说明该蛋白样品可被抗大鼠TREM-1抗体特异性识别,证明该蛋白为TREM-1/IgG融合蛋白.结论 成功构建了大鼠TREM-1/IgG融合蛋白真核表达载体,并在Bm细胞中稳定表达.
目的 構建大鼠髓樣細胞錶達激髮受體-1(TREM-1)/人lgG融閤蛋白的真覈錶達載體,併在傢蠶Bm細胞中實現穩定錶達.方法 剋隆大鼠TREM-1胞外段與人1gGFe段,片段連接後PCR擴增,再與病毒穿梭載體BAC1連接,基因剋降,構建重組質粒.利用]桿狀病毒錶達繫統(Bac-to-Bac)篩選重組桿狀病毒,在Bm細胞中進行融閤錶達,併用Western blot法行蛋白鑒定.結果 重組質粒酶切測序正確,確認剋隆載體構建成功.Western blot結果說明該蛋白樣品可被抗大鼠TREM-1抗體特異性識彆,證明該蛋白為TREM-1/IgG融閤蛋白.結論 成功構建瞭大鼠TREM-1/IgG融閤蛋白真覈錶達載體,併在Bm細胞中穩定錶達.
목적 구건대서수양세포표체격발수체-1(TREM-1)/인lgG융합단백적진핵표체재체,병재가잠Bm세포중실현은정표체.방법 극륭대서TREM-1포외단여인1gGFe단,편단련접후PCR확증,재여병독천사재체BAC1련접,기인극강,구건중조질립.이용]간상병독표체계통(Bac-to-Bac)사선중조간상병독,재Bm세포중진행융합표체,병용Western blot법행단백감정.결과 중조질립매절측서정학,학인극륭재체구건성공.Western blot결과설명해단백양품가피항대서TREM-1항체특이성식별,증명해단백위TREM-1/IgG융합단백.결론 성공구건료대서TREM-1/IgG융합단백진핵표체재체,병재Bm세포중은정표체.
