裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立
렬곡열병독TaqMan형광정량PCR검측방법적건립
Development of a TaqMan real-time fluorescent quantitative PCR assay for detection of Rift Valley Fever virus
  • 万方数据
    中国人兽共患病学报 중국인수공환병학보
    CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
    2012年 4期 315-318 ,共4页

    朱晓文%李林%桑晓宇%高玉伟%胡桂学%冯娜%王铁成%步志高%夏咸柱

    주효문%리림%상효우%고옥위%호계학%풍나%왕철성%보지고%하함주

    裂谷热病毒%实时荧光定量PCR%TaqMan探针 裂穀熱病毒%實時熒光定量PCR%TaqMan探針
    렬곡열병독%실시형광정량PCR%TaqMan탐침
    目的 根据裂谷热病毒(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M片段的保守序列设计并合成特异性引物和TaqMan探针,建立鉴定裂谷热病毒的TaqMan实时荧光定量PCR检测方法.方法 合成裂谷热病毒M片段基因,PCR扩增后将其连入pMD18-T载体,构建重组质粒作为阳性标准品,以10倍系列稀释的标准品进行荧光定量PCR扩增,并绘制标准曲线.结果 所绘制标准曲线的相关系数为0.999,该检测方法的灵敏度达40 copies/μL,特异性好,对除裂谷热病毒外其他病毒(PPRV、HFV、RV、SPPV和GIPV)检测均为阴性.该方法重复性好,批内重复和批间重复的变异系数均小于1%.结论 裂谷热病毒TaqMan荧光定量PCR检测方法的建立为裂谷热病毒的快速准确诊断及流行病学调查提供了有效的手段.
    목적 근거렬곡열병독(Rift Valley Fever Virus,RVFV)M편단적보수서렬설계병합성특이성인물화TaqMan탐침,건립감정렬곡열병독적TaqMan실시형광정량PCR검측방법.방법 합성렬곡열병독M편단기인,PCR확증후장기련입pMD18-T재체,구건중조질립작위양성표준품,이10배계렬희석적표준품진행형광정량PCR확증,병회제표준곡선.결과 소회제표준곡선적상관계수위0.999,해검측방법적령민도체40 copies/μL,특이성호,대제렬곡열병독외기타병독(PPRV、HFV、RV、SPPV화GIPV)검측균위음성.해방법중복성호,비내중복화비간중복적변이계수균소우1%.결론 렬곡열병독TaqMan형광정량PCR검측방법적건립위렬곡열병독적쾌속준학진단급류행병학조사제공료유효적수단.
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