原代大鼠肝细胞分离方法与冻存条件的优化
원대대서간세포분리방법여동존조건적우화
Optimization of the techniques for isolation and cryopreservation of primary rat hepatocytes
  • 万方数据
    重庆医科大学学报 중경의과대학학보
    UNIVERSITATIS SCIENTIAE MEDICINAE CHONGQING
    2003年 3期 303-306 ,共4页

    姚云清%张定凤%倪小毅%卢萍%王波%周卫平%黄爱龙%任红

    요운청%장정봉%예소의%로평%왕파%주위평%황애룡%임홍

    原代肝细胞%分离技术%冻存条件%优化 原代肝細胞%分離技術%凍存條件%優化
    원대간세포%분리기술%동존조건%우화
    目的:优化原代大鼠肝细胞(PRH)分离方法与冻存条件.方法:建立低浓度胶原酶原位循环灌流法分离肝细胞;分别采用含2%与10%DMSO的冻存液于-70℃或液氮中冻存PRH,并比较各组冻存后PRH活力.结果:1该分离方法肝细胞产量为1.584±0.525×108/100g大鼠体重,存活率达95.2±2.9%,肝细胞纯度＞95%,胶原酶用量减少为4.5mg/100g大鼠体重.2.含2%DMSO冻存液于-70℃组与液氮组PRH存活率均可达90%～95%;ALB冻存14d-70℃组PRH明显高于液氮组与新鲜分离组,LDH值于冻存7d的-70℃组与液氮组明显低于新鲜分离组,其它各组间均无显著差异.结论:低浓度胶原酶原位循环灌流法为高效的PRH分离技术;含2%DMSO冻存液于-70℃可作为原代肝细胞冻存的理想条件.
    목적:우화원대대서간세포(PRH)분리방법여동존조건.방법:건립저농도효원매원위순배관류법분리간세포;분별채용함2%여10%DMSO적동존액우-70℃혹액담중동존PRH,병비교각조동존후PRH활력.결과:1해분리방법간세포산량위1.584±0.525×108/100g대서체중,존활솔체95.2±2.9%,간세포순도＞95%,효원매용량감소위4.5mg/100g대서체중.2.함2%DMSO동존액우-70℃조여액담조PRH존활솔균가체90%～95%;ALB동존14d-70℃조PRH명현고우액담조여신선분리조,LDH치우동존7d적-70℃조여액담조명현저우신선분리조,기타각조간균무현저차이.결론:저농도효원매원위순배관류법위고효적PRH분리기술;함2%DMSO동존액우-70℃가작위원대간세포동존적이상조건.
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