中山大学学报(医学科学版)
中山大學學報(醫學科學版)
중산대학학보(의학과학판)
JOURNAL OF SUN YAT-SEN UNIVERSITY(MEDICAL SCIENCES)
2004年
3期
231-233
,共3页
俞琼%杨培增%黄祥坤%李兵%纪淑兴%张锐
俞瓊%楊培增%黃祥坤%李兵%紀淑興%張銳
유경%양배증%황상곤%리병%기숙흥%장예
基因,GATA-3%基因表达
基因,GATA-3%基因錶達
기인,GATA-3%기인표체
[目的]构建GATA-3基因正义、反义重组质粒,为进一步研究GATA-3在T细胞发育分化中的作用提供基础.[方法]采用PCR技术扩增GATA-3基因,通过酶切、连接、转化等分子生物学技术,将该全长基因亚克隆至表达载体pCDNA3,构建质粒后转染大肠杆菌,并在大肠杆菌中扩增.同时用脂质体法感染大鼠脑细胞.[结果]从大鼠脑细胞中成功地克隆出全长1335 bp的GATA-3基因,并经序列分析筛选证实GATA-3基因以正向、反向重组转染入载体,且在大肠杆菌中得到扩增,同时用RT-PCR方法检测到反义重组体对大鼠脑细胞表达该基因具有抑制作用.[结论]通过基因克隆方法成功构建了GATA-3基因正义、反义表达质粒,并初步证实反义GATA-3具有抑制细胞正常表达作用,为深入研究GATA-3对T细胞发育分化的影响奠定了基础.
[目的]構建GATA-3基因正義、反義重組質粒,為進一步研究GATA-3在T細胞髮育分化中的作用提供基礎.[方法]採用PCR技術擴增GATA-3基因,通過酶切、連接、轉化等分子生物學技術,將該全長基因亞剋隆至錶達載體pCDNA3,構建質粒後轉染大腸桿菌,併在大腸桿菌中擴增.同時用脂質體法感染大鼠腦細胞.[結果]從大鼠腦細胞中成功地剋隆齣全長1335 bp的GATA-3基因,併經序列分析篩選證實GATA-3基因以正嚮、反嚮重組轉染入載體,且在大腸桿菌中得到擴增,同時用RT-PCR方法檢測到反義重組體對大鼠腦細胞錶達該基因具有抑製作用.[結論]通過基因剋隆方法成功構建瞭GATA-3基因正義、反義錶達質粒,併初步證實反義GATA-3具有抑製細胞正常錶達作用,為深入研究GATA-3對T細胞髮育分化的影響奠定瞭基礎.
[목적]구건GATA-3기인정의、반의중조질립,위진일보연구GATA-3재T세포발육분화중적작용제공기출.[방법]채용PCR기술확증GATA-3기인,통과매절、련접、전화등분자생물학기술,장해전장기인아극륭지표체재체pCDNA3,구건질립후전염대장간균,병재대장간균중확증.동시용지질체법감염대서뇌세포.[결과]종대서뇌세포중성공지극륭출전장1335 bp적GATA-3기인,병경서렬분석사선증실GATA-3기인이정향、반향중조전염입재체,차재대장간균중득도확증,동시용RT-PCR방법검측도반의중조체대대서뇌세포표체해기인구유억제작용.[결론]통과기인극륭방법성공구건료GATA-3기인정의、반의표체질립,병초보증실반의GATA-3구유억제세포정상표체작용,위심입연구GATA-3대T세포발육분화적영향전정료기출.
