细胞外基质蛋白1对MCF-7和HUVEC增殖影响的研究
세포외기질단백1대MCF-7화HUVEC증식영향적연구
Effect of human extracellular matrix protein 1 on proliferation of MCF-7 and human umbilical vein endothelial cells
  • 万方数据
    第二军医大学学报 제이군의대학학보
    ACADEMIC JOURNAL OF SECOND MILITARY MEDICAL UNIVERSITY
    2004年 12期 1310-1313 ,共4页

    侯彦强%蔡丽君%范列英%罗鹏%何玮%娄加陶%周演武%倪健%孔宪涛%仲人前

    후언강%채려군%범렬영%라붕%하위%루가도%주연무%예건%공헌도%중인전

    细胞外基质蛋白1%MCF-7%人脐静脉内皮细胞%细胞增殖 細胞外基質蛋白1%MCF-7%人臍靜脈內皮細胞%細胞增殖
    세포외기질단백1%MCF-7%인제정맥내피세포%세포증식
    目的:探讨细胞外基质蛋白1(extracellular matrix protein 1,ECM1)对乳腺癌细胞株MCF-7和人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)增殖的影响.方法:构建ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,采用PCR方法,扩增出ECM1基因,用BglⅡ和Kpn Ⅰ双酶切ECM1基因和pEGFP-N2载体,连接酶切目的片段,转化大肠杆菌DH5α,筛选阳性克隆酶切、测序鉴定;利用脂质体介导的转染技术转染MCF-7细胞,药物G418筛选稳定转染细胞株,荧光显微镜检测报告基因表达产物EGFP,免疫组化检测ECM1蛋白表达.用MTT比色法分析ECM1对MCF-7和HUVEC增殖的影响.结果:成功构建了ECM1-pEGFP-N2真核表达载体,并在MCF-7中稳定表达;MTT比色法检测MCF-7增殖结果显示未转染组、空载体转染组和ECM1转染组的D570值分别为0.95±0.07、0.97±0.09和1.03±0.12,三者无明显差异;MTT比色法检测HUVEC增殖结果示培养液组、空载体转染上清组、ECM1转染上清组HUVEC D570值分别为0.89±0.06、0.92±0.09和1.39±0.10,差异具有显著性意义(P＜0.01).结论:ECM1对乳腺癌细胞株MCF-7的增殖无影响,但能显著促进血管内皮细胞体外增殖.
    목적:탐토세포외기질단백1(extracellular matrix protein 1,ECM1)대유선암세포주MCF-7화인제정맥내피세포(human umbilical vein endothelial cell,HUVEC)증식적영향.방법:구건ECM1-pEGFP-N2진핵표체재체,채용PCR방법,확증출ECM1기인,용BglⅡ화Kpn Ⅰ쌍매절ECM1기인화pEGFP-N2재체,련접매절목적편단,전화대장간균DH5α,사선양성극륭매절、측서감정;이용지질체개도적전염기술전염MCF-7세포,약물G418사선은정전염세포주,형광현미경검측보고기인표체산물EGFP,면역조화검측ECM1단백표체.용MTT비색법분석ECM1대MCF-7화HUVEC증식적영향.결과:성공구건료ECM1-pEGFP-N2진핵표체재체,병재MCF-7중은정표체;MTT비색법검측MCF-7증식결과현시미전염조、공재체전염조화ECM1전염조적D570치분별위0.95±0.07、0.97±0.09화1.03±0.12,삼자무명현차이;MTT비색법검측HUVEC증식결과시배양액조、공재체전염상청조、ECM1전염상청조HUVEC D570치분별위0.89±0.06、0.92±0.09화1.39±0.10,차이구유현저성의의(P＜0.01).결론:ECM1대유선암세포주MCF-7적증식무영향,단능현저촉진혈관내피세포체외증식.
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