中国病毒学
中國病毒學
중국병독학
VIROLOGICA SINICA
2006年
6期
614-618
,共5页
袁丽%王玉珍%肖囡%张晓华%戴和平
袁麗%王玉珍%肖囡%張曉華%戴和平
원려%왕옥진%초닙%장효화%대화평
对虾白斑综合症病毒(WSSV)%噬菌体展示随机肽库%单链抗体(scFv)%淘选%模拟抗原表位
對蝦白斑綜閤癥病毒(WSSV)%噬菌體展示隨機肽庫%單鏈抗體(scFv)%淘選%模擬抗原錶位
대하백반종합증병독(WSSV)%서균체전시수궤태고%단련항체(scFv)%도선%모의항원표위
本实验以pCANTAB 5 E噬菌粒为载体,成功构建了较高容量的噬菌体展示随机十肽库,并将其应用于抗原模拟表位的淘选和鉴定.将一种特异识别对虾白斑综合症病毒(White spot syndrome virus, WSSV)的单链抗体A1对十肽库和十五肽库分别进行淘选,结果得到一系列能与单链抗体A1特异性结合的阳性克隆.将这些阳性克隆所编码的多肽氨基酸序列与已知的单链抗体A1的抗原WSSV388片段氨基酸序列做比对,发现多数阳性多肽序列都与WSSV388片段序列的C端一处K····R··R·QS的氨基酸片段相似,由此推论单链抗体A1的模拟抗原表位可能是由该不连续氨基酸片段所构成的构象表位,而非线性表位.研究结果表明,噬菌体展示随机肽库技术是一种用于研究抗原表位结构的有效方法,有助于进一步探讨WSSV的结构蛋白的构象及功能,以及相应单链抗体与细胞受体相互作用的机理.
本實驗以pCANTAB 5 E噬菌粒為載體,成功構建瞭較高容量的噬菌體展示隨機十肽庫,併將其應用于抗原模擬錶位的淘選和鑒定.將一種特異識彆對蝦白斑綜閤癥病毒(White spot syndrome virus, WSSV)的單鏈抗體A1對十肽庫和十五肽庫分彆進行淘選,結果得到一繫列能與單鏈抗體A1特異性結閤的暘性剋隆.將這些暘性剋隆所編碼的多肽氨基痠序列與已知的單鏈抗體A1的抗原WSSV388片段氨基痠序列做比對,髮現多數暘性多肽序列都與WSSV388片段序列的C耑一處K····R··R·QS的氨基痠片段相似,由此推論單鏈抗體A1的模擬抗原錶位可能是由該不連續氨基痠片段所構成的構象錶位,而非線性錶位.研究結果錶明,噬菌體展示隨機肽庫技術是一種用于研究抗原錶位結構的有效方法,有助于進一步探討WSSV的結構蛋白的構象及功能,以及相應單鏈抗體與細胞受體相互作用的機理.
본실험이pCANTAB 5 E서균립위재체,성공구건료교고용량적서균체전시수궤십태고,병장기응용우항원모의표위적도선화감정.장일충특이식별대하백반종합증병독(White spot syndrome virus, WSSV)적단련항체A1대십태고화십오태고분별진행도선,결과득도일계렬능여단련항체A1특이성결합적양성극륭.장저사양성극륭소편마적다태안기산서렬여이지적단련항체A1적항원WSSV388편단안기산서렬주비대,발현다수양성다태서렬도여WSSV388편단서렬적C단일처K····R··R·QS적안기산편단상사,유차추론단련항체A1적모의항원표위가능시유해불련속안기산편단소구성적구상표위,이비선성표위.연구결과표명,서균체전시수궤태고기술시일충용우연구항원표위결구적유효방법,유조우진일보탐토WSSV적결구단백적구상급공능,이급상응단련항체여세포수체상호작용적궤리.
