畜牧与兽医
畜牧與獸醫
축목여수의
ANIMAL HUSBANDRY & VETERINARY MEDICINE
2007年
10期
19-22
,共4页
雌二醇%人工抗原%多克隆抗体
雌二醇%人工抗原%多剋隆抗體
자이순%인공항원%다극륭항체
制备雌二醇完全抗原,并通过免疫家兔得到多克隆抗体,为下一步制备雌二醇单克隆抗体和雌二醇检测ELISA试剂盒奠定基础.试验以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)为载体,采用碳化二亚胺法,合成了雌二醇(E2)的2种免疫偶合物:免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA;通过紫外光谱定性证明偶合物偶联成功与否,并对偶合物的蛋白含量、结合比进行测定并以免疫原E2-BSA免疫家兔,制备多克隆抗体,用包被原E2-OVA进行ELISA,对多克隆抗体特异性及效价进行检测.结果表明成功合成了雌二醇人工抗原即免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA,二者的蛋白浓度分别为5.455和7.533 mg/mL,结合比分别为7∶1和8∶1;制备的多克隆抗体特异性好,血清效价为1∶106.
製備雌二醇完全抗原,併通過免疫傢兔得到多剋隆抗體,為下一步製備雌二醇單剋隆抗體和雌二醇檢測ELISA試劑盒奠定基礎.試驗以牛血清白蛋白(BSA)、卵清蛋白(OVA)為載體,採用碳化二亞胺法,閤成瞭雌二醇(E2)的2種免疫偶閤物:免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA;通過紫外光譜定性證明偶閤物偶聯成功與否,併對偶閤物的蛋白含量、結閤比進行測定併以免疫原E2-BSA免疫傢兔,製備多剋隆抗體,用包被原E2-OVA進行ELISA,對多剋隆抗體特異性及效價進行檢測.結果錶明成功閤成瞭雌二醇人工抗原即免疫原E2-BSA和包被原E2-OVA,二者的蛋白濃度分彆為5.455和7.533 mg/mL,結閤比分彆為7∶1和8∶1;製備的多剋隆抗體特異性好,血清效價為1∶106.
제비자이순완전항원,병통과면역가토득도다극륭항체,위하일보제비자이순단극륭항체화자이순검측ELISA시제합전정기출.시험이우혈청백단백(BSA)、란청단백(OVA)위재체,채용탄화이아알법,합성료자이순(E2)적2충면역우합물:면역원E2-BSA화포피원E2-OVA;통과자외광보정성증명우합물우련성공여부,병대우합물적단백함량、결합비진행측정병이면역원E2-BSA면역가토,제비다극륭항체,용포피원E2-OVA진행ELISA,대다극륭항체특이성급효개진행검측.결과표명성공합성료자이순인공항원즉면역원E2-BSA화포피원E2-OVA,이자적단백농도분별위5.455화7.533 mg/mL,결합비분별위7∶1화8∶1;제비적다극륭항체특이성호,혈청효개위1∶106.