中山大学学报（自然科学版）
中山大學學報（自然科學版）
중산대학학보（자연과학판）
ACTA SCIENTIARUM NATURALIUM UNIVERSITATIS SUNYATSENI
2007年
5期
83-87
,共5页
范益军%欧阳克清%王贵学%罗傲雪
範益軍%歐暘剋清%王貴學%囉傲雪
범익군%구양극청%왕귀학%라오설
胰升血糖素样肽-1受体%2型糖尿病%高通量筛选%报告基因
胰升血糖素樣肽-1受體%2型糖尿病%高通量篩選%報告基因
이승혈당소양태-1수체%2형당뇨병%고통량사선%보고기인
为建立GLP-1受体激动剂的高通量筛选方法,将GLP-1受体质粒和报告基因质粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC/pGL3)按照1∶5的比例共转染到CHO细胞中,建立GLP-1受体激动剂筛选细胞株.利用GLP-1内源激动剂探索和优化每孔细胞接种密度、荧光素酶表达时间、Bright-GloTM试剂用量、DMSO浓度等筛选条件,建立可靠的筛选方法.当细胞数目为4×104个/孔,激动剂孵育时间为8 h,Bright-GloTM试剂4倍稀释,每孔DMSO终质量分数小于1%时,系统Z'-因子为0.75.利用此模型对中药提取物库进行检测,发现有5个样品显示出活性.结果表明,该模型能够用于GLP-1受体激动剂的高通量筛选.
為建立GLP-1受體激動劑的高通量篩選方法,將GLP-1受體質粒和報告基因質粒(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC/pGL3)按照1∶5的比例共轉染到CHO細胞中,建立GLP-1受體激動劑篩選細胞株.利用GLP-1內源激動劑探索和優化每孔細胞接種密度、熒光素酶錶達時間、Bright-GloTM試劑用量、DMSO濃度等篩選條件,建立可靠的篩選方法.噹細胞數目為4×104箇/孔,激動劑孵育時間為8 h,Bright-GloTM試劑4倍稀釋,每孔DMSO終質量分數小于1%時,繫統Z'-因子為0.75.利用此模型對中藥提取物庫進行檢測,髮現有5箇樣品顯示齣活性.結果錶明,該模型能夠用于GLP-1受體激動劑的高通量篩選.
위건립GLP-1수체격동제적고통량사선방법,장GLP-1수체질립화보고기인질립(3×CRE/3×MRE/SRE-LUC/pGL3)안조1∶5적비례공전염도CHO세포중,건립GLP-1수체격동제사선세포주.이용GLP-1내원격동제탐색화우화매공세포접충밀도、형광소매표체시간、Bright-GloTM시제용량、DMSO농도등사선조건,건립가고적사선방법.당세포수목위4×104개/공,격동제부육시간위8 h,Bright-GloTM시제4배희석,매공DMSO종질량분수소우1%시,계통Z'-인자위0.75.이용차모형대중약제취물고진행검측,발현유5개양품현시출활성.결과표명,해모형능구용우GLP-1수체격동제적고통량사선.
