江苏大学学报（医学版）
江囌大學學報（醫學版）
강소대학학보（의학판）
JOURNAL OF JIANGSU UNIVERSITY (MEDICINE EDITION)
2008年
2期
93-96
,共4页
朱超望%茅凌翔%徐顺高%黄新祥
硃超望%茅凌翔%徐順高%黃新祥
주초망%모릉상%서순고%황신상
伤寒沙门菌%fljB基因%β-半乳糖苷酶基因%基因融合
傷寒沙門菌%fljB基因%β-半乳糖苷酶基因%基因融閤
상한사문균%fljB기인%β-반유당감매기인%기인융합
目的:为研究伤寒沙门菌z66鞭毛抗原编码基因fljB的表达调节机制,建立该fljB 基因的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)插入变异株.方法:采用自杀质粒介导的同源重组方法进行制备.设计加接KpnⅠ和SalⅠ的特异性引物,用PCR扩增获得fljB基因的上、下游同源性DNA片段,并与用KpnⅠ和SalⅠ酶切pSV-β-半乳糖苷酶载体(pSV-β-galactosidase vector)的片段定向连接,将连接片段克隆至自杀质粒pGMB151,再通过电击法将重组质粒转入伤寒沙门菌,在含X-Gal的蔗糖平板上筛选获得同源重组的变异株.结果:经筛选获得阳性克隆,经PCR及序列分析证实,fljB基因中的763 bp被3 550 bp的lacZ片段替代.结论:成功构建伤寒沙门菌flj::lacZ突变株,为进一步研究fljB基因表达调节机制奠定了基础.
目的:為研究傷寒沙門菌z66鞭毛抗原編碼基因fljB的錶達調節機製,建立該fljB 基因的β-半乳糖苷酶基因(lacZ)插入變異株.方法:採用自殺質粒介導的同源重組方法進行製備.設計加接KpnⅠ和SalⅠ的特異性引物,用PCR擴增穫得fljB基因的上、下遊同源性DNA片段,併與用KpnⅠ和SalⅠ酶切pSV-β-半乳糖苷酶載體(pSV-β-galactosidase vector)的片段定嚮連接,將連接片段剋隆至自殺質粒pGMB151,再通過電擊法將重組質粒轉入傷寒沙門菌,在含X-Gal的蔗糖平闆上篩選穫得同源重組的變異株.結果:經篩選穫得暘性剋隆,經PCR及序列分析證實,fljB基因中的763 bp被3 550 bp的lacZ片段替代.結論:成功構建傷寒沙門菌flj::lacZ突變株,為進一步研究fljB基因錶達調節機製奠定瞭基礎.
목적:위연구상한사문균z66편모항원편마기인fljB적표체조절궤제,건립해fljB 기인적β-반유당감매기인(lacZ)삽입변이주.방법:채용자살질립개도적동원중조방법진행제비.설계가접KpnⅠ화SalⅠ적특이성인물,용PCR확증획득fljB기인적상、하유동원성DNA편단,병여용KpnⅠ화SalⅠ매절pSV-β-반유당감매재체(pSV-β-galactosidase vector)적편단정향련접,장련접편단극륭지자살질립pGMB151,재통과전격법장중조질립전입상한사문균,재함X-Gal적자당평판상사선획득동원중조적변이주.결과:경사선획득양성극륭,경PCR급서렬분석증실,fljB기인중적763 bp피3 550 bp적lacZ편단체대.결론:성공구건상한사문균flj::lacZ돌변주,위진일보연구fljB기인표체조절궤제전정료기출.
