中国病原生物学杂志
中國病原生物學雜誌
중국병원생물학잡지
JOURNAL OF PATHOGEN BIOLOGY
2008年
9期
644-647,650
,共5页
郑学星%杨松涛%侯小强%王化磊%孙培录%刘林立%夏咸柱
鄭學星%楊鬆濤%侯小彊%王化磊%孫培錄%劉林立%夏鹹柱
정학성%양송도%후소강%왕화뢰%손배록%류림립%하함주
狂犬病病毒%荧光定量RT-PCR%TaqMan荧光探针
狂犬病病毒%熒光定量RT-PCR%TaqMan熒光探針
광견병병독%형광정량RT-PCR%TaqMan형광탐침
目的 建立狂犬病病毒快速检测法.方法 根据狂犬病病毒核蛋白基因的保守序列分别设计两对引物及其相应的TaqMan探针.构建pMD-N重组质粒,建立荧光定量RT-PCR绝对定量标准品,并对反应体系进行优化, 建立绝对定量的标准曲线.利用10倍稀释法检验方法的灵敏度并与普通RT-PCR法进行比较;作重复性和特异性检验后进行临床标本的检测.结果 构建了绝对定量的参照质粒,标准曲线相关系数为0.998.狂犬病病毒荧光定量RT-PCR检测反应的灵敏度为10个TCID50;5种非狂犬病病原体检测均为阴性.结论 建立的狂犬病病毒的荧光定量RT-PCR检测方法快速、特异性强、灵敏度高、稳定性好,可以应用于临床样品的检测.
目的 建立狂犬病病毒快速檢測法.方法 根據狂犬病病毒覈蛋白基因的保守序列分彆設計兩對引物及其相應的TaqMan探針.構建pMD-N重組質粒,建立熒光定量RT-PCR絕對定量標準品,併對反應體繫進行優化, 建立絕對定量的標準麯線.利用10倍稀釋法檢驗方法的靈敏度併與普通RT-PCR法進行比較;作重複性和特異性檢驗後進行臨床標本的檢測.結果 構建瞭絕對定量的參照質粒,標準麯線相關繫數為0.998.狂犬病病毒熒光定量RT-PCR檢測反應的靈敏度為10箇TCID50;5種非狂犬病病原體檢測均為陰性.結論 建立的狂犬病病毒的熒光定量RT-PCR檢測方法快速、特異性彊、靈敏度高、穩定性好,可以應用于臨床樣品的檢測.
목적 건립광견병병독쾌속검측법.방법 근거광견병병독핵단백기인적보수서렬분별설계량대인물급기상응적TaqMan탐침.구건pMD-N중조질립,건립형광정량RT-PCR절대정량표준품,병대반응체계진행우화, 건립절대정량적표준곡선.이용10배희석법검험방법적령민도병여보통RT-PCR법진행비교;작중복성화특이성검험후진행림상표본적검측.결과 구건료절대정량적삼조질립,표준곡선상관계수위0.998.광견병병독형광정량RT-PCR검측반응적령민도위10개TCID50;5충비광견병병원체검측균위음성.결론 건립적광견병병독적형광정량RT-PCR검측방법쾌속、특이성강、령민도고、은정성호,가이응용우림상양품적검측.
