CAJ | 학술논문

本研究探讨中药黄芩苷对耐阿霉素人髓系白血病细胞株HL-60/ADR增殖、凋亡的影响.应用岍法绘制细胞生长曲线,观察黄芩苷对HL-60/ADR细胞增殖的影响;应用Annexin V FITC/PI双染流式细胞术、DNA片段化、TdT酶介导的原位缺口末端标记(TUNEL)法检测细胞凋亡;RT-PCR检测黄芩苷作用不同时段后c-myc、bcl-2等凋亡相关基因mRNA的表达水平;Western blot法检测凋亡及信号通路相关蛋白C-MYC、BCL-2、procaspase-3、PARP、BAD等的表达变化.结果表明,黄芩苷能明显抑制HL-60/ADR细胞增殖所测得的细胞倍增时间为48小时,半数抑制率为28 μmol/L;Annexin V FITC/PI法检测到早期凋亡细胞、DNA片段化,TUNEL法检测到晚期凋亡细胞,细胞凋亡率呈浓度依赖性(20、40、80 μmol/L).黄芩苷作用HL-60/ADR细胞不同时段(12、24、48小时)后c-myc、bcl-2基因mRNA的表达,并随着作用时间的延长而逐渐减弱,C-MYC、BCL-2、procaspase-3、PARP(116 kD)蛋白的表达逐渐下降,PARP(85 kD)及BAD蛋白表达逐渐增强,呈时间依赖性.结论:黄芩苷能有效抑制HL-60/ADR细胞增殖,诱导其凋亡,上述凋亡相关基因及信号通路相关蛋白可能参与了黄芩苷抑制HL-60/ADR细胞增殖和诱导凋亡的过程.
본연구탐토중약황금감대내아매소인수계백혈병세포주HL-60/ADR증식、조망적영향.응용견법회제세포생장곡선,관찰황금감대HL-60/ADR세포증식적영향;응용Annexin V FITC/PI쌍염류식세포술、DNA편단화、TdT매개도적원위결구말단표기(TUNEL)법검측세포조망;RT-PCR검측황금감작용불동시단후c-myc、bcl-2등조망상관기인mRNA적표체수평;Western blot법검측조망급신호통로상관단백C-MYC、BCL-2、procaspase-3、PARP、BAD등적표체변화.결과표명,황금감능명현억제HL-60/ADR세포증식소측득적세포배증시간위48소시,반수억제솔위28 μmol/L;Annexin V FITC/PI법검측도조기조망세포、DNA편단화,TUNEL법검측도만기조망세포,세포조망솔정농도의뢰성(20、40、80 μmol/L).황금감작용HL-60/ADR세포불동시단(12、24、48소시)후c-myc、bcl-2기인mRNA적표체,병수착작용시간적연장이축점감약,C-MYC、BCL-2、procaspase-3、PARP(116 kD)단백적표체축점하강,PARP(85 kD)급BAD단백표체축점증강,정시간의뢰성.결론:황금감능유효억제HL-60/ADR세포증식,유도기조망,상술조망상관기인급신호통로상관단백가능삼여료황금감억제HL-60/ADR세포증식화유도조망적과정.