解放军医药杂志
解放軍醫藥雜誌
해방군의약잡지
MEDICAL&PHARMACEUTICAL JOURNAL OF CHINESE PEOPLE'S LIBERATION ARMY
2011年
3期
16-20,封3
,共6页
缩宫素受体%同源多聚体%免疫沉淀法%免疫印迹法%大鼠,Wistar
縮宮素受體%同源多聚體%免疫沉澱法%免疫印跡法%大鼠,Wistar
축궁소수체%동원다취체%면역침정법%면역인적법%대서,Wistar
目的 研究缩宫素受体(oxytocin receptor,OTR)在体外培养细胞中及动物组织中的主要存在形式,为进一步研究OTR多聚化的部位及多聚化在OTR功能调节中的作用提供依据.方法 取体外培养的中国仓鼠(CHO)细胞中表达的OTR及大鼠不同的组织,分别用anti-OTR抗体进行免疫沉淀及免疫印迹,观察得到的OTR条带的情况;分别在样品中加入还原剂DTT,再进行免疫印迹,观察得到OTR条带的大小与数量.结果 在体外培养的细胞中检测到OTR的多聚体,在大鼠的组织中同样也检测到OTR的多聚体.表明在动物体内,OTR也是以多聚体形式存在,跟体外细胞表达的OTR形成的多聚体不同的是,在动物体内的OTR多聚体主要以四聚体为主,而二聚体、三聚体量很少,特别是三聚体,几乎没有.OTR的多聚体可被还原剂DTT还原为单体形式.结论 OTR形成的多聚体是一种同源多聚体,此种多聚体中的单体是由共价键连接,而这种共价键最常见的是半胱氨酸残基间形成的二硫键,因此推测半胱氨酸残基是OTR多聚体形成的关键残基.
目的 研究縮宮素受體(oxytocin receptor,OTR)在體外培養細胞中及動物組織中的主要存在形式,為進一步研究OTR多聚化的部位及多聚化在OTR功能調節中的作用提供依據.方法 取體外培養的中國倉鼠(CHO)細胞中錶達的OTR及大鼠不同的組織,分彆用anti-OTR抗體進行免疫沉澱及免疫印跡,觀察得到的OTR條帶的情況;分彆在樣品中加入還原劑DTT,再進行免疫印跡,觀察得到OTR條帶的大小與數量.結果 在體外培養的細胞中檢測到OTR的多聚體,在大鼠的組織中同樣也檢測到OTR的多聚體.錶明在動物體內,OTR也是以多聚體形式存在,跟體外細胞錶達的OTR形成的多聚體不同的是,在動物體內的OTR多聚體主要以四聚體為主,而二聚體、三聚體量很少,特彆是三聚體,幾乎沒有.OTR的多聚體可被還原劑DTT還原為單體形式.結論 OTR形成的多聚體是一種同源多聚體,此種多聚體中的單體是由共價鍵連接,而這種共價鍵最常見的是半胱氨痠殘基間形成的二硫鍵,因此推測半胱氨痠殘基是OTR多聚體形成的關鍵殘基.
목적 연구축궁소수체(oxytocin receptor,OTR)재체외배양세포중급동물조직중적주요존재형식,위진일보연구OTR다취화적부위급다취화재OTR공능조절중적작용제공의거.방법 취체외배양적중국창서(CHO)세포중표체적OTR급대서불동적조직,분별용anti-OTR항체진행면역침정급면역인적,관찰득도적OTR조대적정황;분별재양품중가입환원제DTT,재진행면역인적,관찰득도OTR조대적대소여수량.결과 재체외배양적세포중검측도OTR적다취체,재대서적조직중동양야검측도OTR적다취체.표명재동물체내,OTR야시이다취체형식존재,근체외세포표체적OTR형성적다취체불동적시,재동물체내적OTR다취체주요이사취체위주,이이취체、삼취체량흔소,특별시삼취체,궤호몰유.OTR적다취체가피환원제DTT환원위단체형식.결론 OTR형성적다취체시일충동원다취체,차충다취체중적단체시유공개건련접,이저충공개건최상견적시반광안산잔기간형성적이류건,인차추측반광안산잔기시OTR다취체형성적관건잔기.