解剖学报
解剖學報
해부학보
ACTA ANATOMICA SINICA
2011年
4期
489-493
,共5页
刘丽霞%邵素霞%张雷%陈红霞%赵春芳
劉麗霞%邵素霞%張雷%陳紅霞%趙春芳
류려하%소소하%장뢰%진홍하%조춘방
骨骼肌成肌细胞%心肌细胞%共培养%缝隙连接蛋白43%缝隙连接%免疫印迹法%大鼠
骨骼肌成肌細胞%心肌細胞%共培養%縫隙連接蛋白43%縫隙連接%免疫印跡法%大鼠
골격기성기세포%심기세포%공배양%봉극련접단백43%봉극련접%면역인적법%대서
目的 观察体外共培养的乳鼠心肌细胞与大鼠骨骼肌成肌细胞(简称L6细胞)以及乳鼠心肌细胞与转染外源性缝隙连接蛋白43(Cx43)基因的L6细胞(简称L6-Cx43细胞)间Cx43蛋白的表达情况,从而探讨共培养时心肌环境对成肌细胞的作用.方法 将乳鼠心肌细胞与4′,6-二脒基-2-苯基吲哚标记的大鼠骨骼肌成肌细胞进行共培养,用免疫荧光双标方法检测共培养后两种细胞中Cx43的表达定位;用Western blotting方法检测共培养对成肌细胞中Cx43蛋白表达量的影响及共培养时间对成肌细胞Cx43蛋白表达水平的影响.结果 免疫荧光双标结果显示,共培养后两种细胞接触的细胞膜上均有Cx43的表达;Western blotting结果进一步证实,共培养后成肌细胞中Cx43蛋白的表达增多,L6-Cx43细胞中Cx43增多更明显.结论 心肌环境能够促进成肌细胞Cx43蛋白的表达,且两种细胞接触是必需的,转染外源性Cx43可以提高这种作用.
目的 觀察體外共培養的乳鼠心肌細胞與大鼠骨骼肌成肌細胞(簡稱L6細胞)以及乳鼠心肌細胞與轉染外源性縫隙連接蛋白43(Cx43)基因的L6細胞(簡稱L6-Cx43細胞)間Cx43蛋白的錶達情況,從而探討共培養時心肌環境對成肌細胞的作用.方法 將乳鼠心肌細胞與4′,6-二脒基-2-苯基吲哚標記的大鼠骨骼肌成肌細胞進行共培養,用免疫熒光雙標方法檢測共培養後兩種細胞中Cx43的錶達定位;用Western blotting方法檢測共培養對成肌細胞中Cx43蛋白錶達量的影響及共培養時間對成肌細胞Cx43蛋白錶達水平的影響.結果 免疫熒光雙標結果顯示,共培養後兩種細胞接觸的細胞膜上均有Cx43的錶達;Western blotting結果進一步證實,共培養後成肌細胞中Cx43蛋白的錶達增多,L6-Cx43細胞中Cx43增多更明顯.結論 心肌環境能夠促進成肌細胞Cx43蛋白的錶達,且兩種細胞接觸是必需的,轉染外源性Cx43可以提高這種作用.
목적 관찰체외공배양적유서심기세포여대서골격기성기세포(간칭L6세포)이급유서심기세포여전염외원성봉극련접단백43(Cx43)기인적L6세포(간칭L6-Cx43세포)간Cx43단백적표체정황,종이탐토공배양시심기배경대성기세포적작용.방법 장유서심기세포여4′,6-이미기-2-분기신타표기적대서골격기성기세포진행공배양,용면역형광쌍표방법검측공배양후량충세포중Cx43적표체정위;용Western blotting방법검측공배양대성기세포중Cx43단백표체량적영향급공배양시간대성기세포Cx43단백표체수평적영향.결과 면역형광쌍표결과현시,공배양후량충세포접촉적세포막상균유Cx43적표체;Western blotting결과진일보증실,공배양후성기세포중Cx43단백적표체증다,L6-Cx43세포중Cx43증다경명현.결론 심기배경능구촉진성기세포Cx43단백적표체,차량충세포접촉시필수적,전염외원성Cx43가이제고저충작용.
