CAJ | 학술논문

目的:通过对NB细胞系SH-SY5Y进行体外实验,研究ATRA对NB细胞的增殖抑制与诱导分化作用,进而探讨TrkA剪接异构体在不同分化程度的SH-SY5Y细胞中的表达情况.方法:将SH-SY5Y细胞取对数生长期细胞培养分组,利用台盼蓝拒染计数活细胞,倒置相差显微镜观察细胞形态学变化.采用SYBR Green Ⅰ实时荧光定量PCR方法检测TrkA三种剪接异构体的表达水平.结果:对照组活细胞数随着培养时间延长而增多,实验组中ATRA对SH-SY5Y的生长抑制作用在(0.1-10)μmol/L浓度范围内有剂量依赖关系.不同浓度的ATRA均可诱导SH-SY5Y细胞产生形态学上的变化,对照组细胞分化百分率随时间延长无明显变化,各时间段间比较,差异不显著(F=2.889,P=0.079 ).TrkAⅠ/ⅡmRNA 表达水平增加与ATRA浓度及作用时间呈正相关.TrkAⅢ mRNA表达与ATRA浓度及作用时间呈负相关.结论:在SH-SY5Y细胞中,ATRA对细胞生长抑制作用呈明显的时间和剂量依赖关系;TrkAⅠ/Ⅱ表达与ATRA作用时间、剂量呈正相关;随着ATRA作用浓度及作用时间的增加,TrkAⅢ mRNA表达降低.
목적:통과대NB세포계SH-SY5Y진행체외실험,연구ATRA대NB세포적증식억제여유도분화작용,진이탐토TrkA전접이구체재불동분화정도적SH-SY5Y세포중적표체정황.방법:장SH-SY5Y세포취대수생장기세포배양분조,이용태반람거염계수활세포,도치상차현미경관찰세포형태학변화.채용SYBR Green Ⅰ실시형광정량PCR방법검측TrkA삼충전접이구체적표체수평.결과:대조조활세포수수착배양시간연장이증다,실험조중ATRA대SH-SY5Y적생장억제작용재(0.1-10)μmol/L농도범위내유제량의뢰관계.불동농도적ATRA균가유도SH-SY5Y세포산생형태학상적변화,대조조세포분화백분솔수시간연장무명현변화,각시간단간비교,차이불현저(F=2.889,P=0.079 ).TrkAⅠ/ⅡmRNA 표체수평증가여ATRA농도급작용시간정정상관.TrkAⅢ mRNA표체여ATRA농도급작용시간정부상관.결론:재SH-SY5Y세포중,ATRA대세포생장억제작용정명현적시간화제량의뢰관계;TrkAⅠ/Ⅱ표체여ATRA작용시간、제량정정상관;수착ATRA작용농도급작용시간적증가,TrkAⅢ mRNA표체강저.