山西农业大学学报（自然科学版）
山西農業大學學報（自然科學版）
산서농업대학학보（자연과학판）
JOURNAL OF SHANXI AGRICULTURAL UNIVERSITY(NATURAL SCIENCE EDITION)
2011年
4期
315-320
,共6页
文冠果%RAPD%体系优化
文冠果%RAPD%體繫優化
문관과%RAPD%체계우화
以山西省20个县的文冠果为材料,采用改良的CTAB法提取文冠果基因组DNA,并对文冠果RAPD分析的最佳反应体系进行优化.结果表明,文冠果RAPD分析的最适反应体系为:PCR扩增的总体积为20 μL,包括30 ng的模板DNA,10×PCR buffer 2 μ.L,2.0 mmol·L-1Mg2+,0.1 mmol·L- dNTP,Taq酶1U,不足的体积用超纯水补足.扩增程序为:94℃预变性120 s,94℃变性30 s,36.9℃退火45 s,72℃延伸90 s,45个循环后在72℃延伸300 s,结束后在4℃条件下保存.在此最佳反应条件下,RAPD分析具有良好的稳定性和可重复性.
以山西省20箇縣的文冠果為材料,採用改良的CTAB法提取文冠果基因組DNA,併對文冠果RAPD分析的最佳反應體繫進行優化.結果錶明,文冠果RAPD分析的最適反應體繫為:PCR擴增的總體積為20 μL,包括30 ng的模闆DNA,10×PCR buffer 2 μ.L,2.0 mmol·L-1Mg2+,0.1 mmol·L- dNTP,Taq酶1U,不足的體積用超純水補足.擴增程序為:94℃預變性120 s,94℃變性30 s,36.9℃退火45 s,72℃延伸90 s,45箇循環後在72℃延伸300 s,結束後在4℃條件下保存.在此最佳反應條件下,RAPD分析具有良好的穩定性和可重複性.
이산서성20개현적문관과위재료,채용개량적CTAB법제취문관과기인조DNA,병대문관과RAPD분석적최가반응체계진행우화.결과표명,문관과RAPD분석적최괄반응체계위:PCR확증적총체적위20 μL,포괄30 ng적모판DNA,10×PCR buffer 2 μ.L,2.0 mmol·L-1Mg2+,0.1 mmol·L- dNTP,Taq매1U,불족적체적용초순수보족.확증정서위:94℃예변성120 s,94℃변성30 s,36.9℃퇴화45 s,72℃연신90 s,45개순배후재72℃연신300 s,결속후재4℃조건하보존.재차최가반응조건하,RAPD분석구유량호적은정성화가중복성.
