江苏农业学报
江囌農業學報
강소농업학보
JIANGSU JOURNAL OF AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
1181-1185
,共5页
杜秀贞%李培培%潘小玫%宋从凤
杜秀貞%李培培%潘小玫%宋從鳳
두수정%리배배%반소매%송종봉
小麦%TA50-10蛋白%类蛋白激酶基因%TMV抗性
小麥%TA50-10蛋白%類蛋白激酶基因%TMV抗性
소맥%TA50-10단백%류단백격매기인%TMV항성
TA50-10是小麦中的一个截短的cDNA序列,与水稻白叶枯病菌harpin蛋白基因hpa1x∞(又称hrfl,hrfA)具有59%的一致性,它编码的多肽有类蛋白激酶催化域(Protein kinase like domain).为了研究TA50-10蛋白质的生物学性状和功能以及与harpin蛋白的关系,用PCR法从小麦cDNA中扩增到TA50-10基因,并以pET30a(+)为载体构建了原核表达重组体pEY30-TA50-10.将其转化大肠杆菌后在异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)的诱导下获得了表达蛋白质,并研究了该表达蛋白质诱导烟草抗烟草花叶病毒(TMV)的作用.结果表明:原核表达的TA50-10蛋白质具有热稳定性;用热处理后部分纯化的TA50-10蛋白质溶液喷施烟草叶片能够诱导三生烟草局部抗TMV,并且诱抗效果在处理后10 d内没有明显改变.
TA50-10是小麥中的一箇截短的cDNA序列,與水稻白葉枯病菌harpin蛋白基因hpa1x∞(又稱hrfl,hrfA)具有59%的一緻性,它編碼的多肽有類蛋白激酶催化域(Protein kinase like domain).為瞭研究TA50-10蛋白質的生物學性狀和功能以及與harpin蛋白的關繫,用PCR法從小麥cDNA中擴增到TA50-10基因,併以pET30a(+)為載體構建瞭原覈錶達重組體pEY30-TA50-10.將其轉化大腸桿菌後在異丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)的誘導下穫得瞭錶達蛋白質,併研究瞭該錶達蛋白質誘導煙草抗煙草花葉病毒(TMV)的作用.結果錶明:原覈錶達的TA50-10蛋白質具有熱穩定性;用熱處理後部分純化的TA50-10蛋白質溶液噴施煙草葉片能夠誘導三生煙草跼部抗TMV,併且誘抗效果在處理後10 d內沒有明顯改變.
TA50-10시소맥중적일개절단적cDNA서렬,여수도백협고병균harpin단백기인hpa1x∞(우칭hrfl,hrfA)구유59%적일치성,타편마적다태유류단백격매최화역(Protein kinase like domain).위료연구TA50-10단백질적생물학성상화공능이급여harpin단백적관계,용PCR법종소맥cDNA중확증도TA50-10기인,병이pET30a(+)위재체구건료원핵표체중조체pEY30-TA50-10.장기전화대장간균후재이병기류대-β-D-반유당감(IPTG)적유도하획득료표체단백질,병연구료해표체단백질유도연초항연초화협병독(TMV)적작용.결과표명:원핵표체적TA50-10단백질구유열은정성;용열처리후부분순화적TA50-10단백질용액분시연초협편능구유도삼생연초국부항TMV,병차유항효과재처리후10 d내몰유명현개변.