实用儿科临床杂志
實用兒科臨床雜誌
실용인과림상잡지
Journal of Applied Clinical Pediatrics
2009年
22期
1714-1716,1745
,共4页
谢琴芳%赵晓东%张琴%黄路%毛华伟%赵耀
謝琴芳%趙曉東%張琴%黃路%毛華偉%趙耀
사금방%조효동%장금%황로%모화위%조요
人偏肺病毒%融合蛋白%N-糖基化位点%重组突变质粒
人偏肺病毒%融閤蛋白%N-糖基化位點%重組突變質粒
인편폐병독%융합단백%N-당기화위점%중조돌변질립
目的 预测人偏肺病毒(hMPV)融合蛋白N-糖摹化位点,构建N-糖基化修饰突变体.方法 NetNGlyc1.0 Server神经网络软件预测hMPV 4个亚型代表株F蛋白氨基酸序列的N-糖基化位点;根据预测结果针对性地没计突变引物,应用基因工程技术进行定点突变,从而获得特定位点去糖基化的F基因,包括单位点突变体、双位点突变体及三位点突变体;双酶切鉴定、基因序列分析重组质粒,明确N-糖基化修饰突变体构建是否成功.结果 hMPV 4个亚型代表株F蛋白氨基酸序列从N端起第57、172、353位均存在可能性大于50%的N-糖基化位点.构建hMPV F蛋白7个不同的N-糖基化修饰突变体,并通过序列分析测定证实重组突变质粒构建成功.结论 hMPV F蛋白的N-糖基化位点保守,不同亚型的代表株有相同的糖基化位点,利用定点突变技术成功构建了糖基化突变体重组质粒.
目的 預測人偏肺病毒(hMPV)融閤蛋白N-糖摹化位點,構建N-糖基化脩飾突變體.方法 NetNGlyc1.0 Server神經網絡軟件預測hMPV 4箇亞型代錶株F蛋白氨基痠序列的N-糖基化位點;根據預測結果針對性地沒計突變引物,應用基因工程技術進行定點突變,從而穫得特定位點去糖基化的F基因,包括單位點突變體、雙位點突變體及三位點突變體;雙酶切鑒定、基因序列分析重組質粒,明確N-糖基化脩飾突變體構建是否成功.結果 hMPV 4箇亞型代錶株F蛋白氨基痠序列從N耑起第57、172、353位均存在可能性大于50%的N-糖基化位點.構建hMPV F蛋白7箇不同的N-糖基化脩飾突變體,併通過序列分析測定證實重組突變質粒構建成功.結論 hMPV F蛋白的N-糖基化位點保守,不同亞型的代錶株有相同的糖基化位點,利用定點突變技術成功構建瞭糖基化突變體重組質粒.
목적 예측인편폐병독(hMPV)융합단백N-당모화위점,구건N-당기화수식돌변체.방법 NetNGlyc1.0 Server신경망락연건예측hMPV 4개아형대표주F단백안기산서렬적N-당기화위점;근거예측결과침대성지몰계돌변인물,응용기인공정기술진행정점돌변,종이획득특정위점거당기화적F기인,포괄단위점돌변체、쌍위점돌변체급삼위점돌변체;쌍매절감정、기인서렬분석중조질립,명학N-당기화수식돌변체구건시부성공.결과 hMPV 4개아형대표주F단백안기산서렬종N단기제57、172、353위균존재가능성대우50%적N-당기화위점.구건hMPV F단백7개불동적N-당기화수식돌변체,병통과서렬분석측정증실중조돌변질립구건성공.결론 hMPV F단백적N-당기화위점보수,불동아형적대표주유상동적당기화위점,이용정점돌변기술성공구건료당기화돌변체중조질립.
