肝脏
肝髒
간장
CHINESE HEPATOLOGY
2004年
3期
145-147
,共3页
蒋炜%王吉耀%杨长青%刘文滨%王逸青
蔣煒%王吉耀%楊長青%劉文濱%王逸青
장위%왕길요%양장청%류문빈%왕일청
肝星状细胞%转化生长因子β%Ⅰ型受体%反义
肝星狀細胞%轉化生長因子β%Ⅰ型受體%反義
간성상세포%전화생장인자β%Ⅰ형수체%반의
目的观察反义转化生长因子(TGF)βⅠ型受体(TβRⅠ)表达质粒对大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及细胞外基质分泌的影响.方法双酶灌注和梯度离心法分离大鼠HSC,将构建的反义TβRⅠ真核细胞表达质粒与pcDNA3空质粒经脂质体转染培养活化的HSC,通过RT-PCR、Western印迹检测外源导入质粒在HSC中的表达,采用MTT法、3H-TdR掺入法检测细胞增殖情况,ELISA法检测TGF-β1含量变化,并应用Western印迹检测HSC中Ⅰ、Ⅲ型胶原表达.结果反义TβRⅠ真核细胞表达质粒可抑制活化HSC中TβRⅠ mRNA及蛋白表达.与pcDNA3转染组相比,反义TβRⅠ质粒表达可抑制HSC增殖(P＜0.01),降低TGF-β1含量(P＜0.05),抑制Ⅰ、Ⅲ型胶原分泌(P＜0.05).结论重组反义TβRⅠ表达质粒可在HSC中获得较好表达,并可显著抑制HSC增殖及细胞外基质分泌.
目的觀察反義轉化生長因子(TGF)βⅠ型受體(TβRⅠ)錶達質粒對大鼠肝星狀細胞(HSC)增殖及細胞外基質分泌的影響.方法雙酶灌註和梯度離心法分離大鼠HSC,將構建的反義TβRⅠ真覈細胞錶達質粒與pcDNA3空質粒經脂質體轉染培養活化的HSC,通過RT-PCR、Western印跡檢測外源導入質粒在HSC中的錶達,採用MTT法、3H-TdR摻入法檢測細胞增殖情況,ELISA法檢測TGF-β1含量變化,併應用Western印跡檢測HSC中Ⅰ、Ⅲ型膠原錶達.結果反義TβRⅠ真覈細胞錶達質粒可抑製活化HSC中TβRⅠ mRNA及蛋白錶達.與pcDNA3轉染組相比,反義TβRⅠ質粒錶達可抑製HSC增殖(P＜0.01),降低TGF-β1含量(P＜0.05),抑製Ⅰ、Ⅲ型膠原分泌(P＜0.05).結論重組反義TβRⅠ錶達質粒可在HSC中穫得較好錶達,併可顯著抑製HSC增殖及細胞外基質分泌.
목적관찰반의전화생장인자(TGF)βⅠ형수체(TβRⅠ)표체질립대대서간성상세포(HSC)증식급세포외기질분비적영향.방법쌍매관주화제도리심법분리대서HSC,장구건적반의TβRⅠ진핵세포표체질립여pcDNA3공질립경지질체전염배양활화적HSC,통과RT-PCR、Western인적검측외원도입질립재HSC중적표체,채용MTT법、3H-TdR참입법검측세포증식정황,ELISA법검측TGF-β1함량변화,병응용Western인적검측HSC중Ⅰ、Ⅲ형효원표체.결과반의TβRⅠ진핵세포표체질립가억제활화HSC중TβRⅠ mRNA급단백표체.여pcDNA3전염조상비,반의TβRⅠ질립표체가억제HSC증식(P＜0.01),강저TGF-β1함량(P＜0.05),억제Ⅰ、Ⅲ형효원분비(P＜0.05).결론중조반의TβRⅠ표체질립가재HSC중획득교호표체,병가현저억제HSC증식급세포외기질분비.
