CAJ | 학술논문

为提高缩叶肉质盐生植物海蓬子总RNA和mRNA的质量,将改良CTAB法与Tripure 试剂盒方法相结合, 从 300 mg海蓬子发芽后20 d的幼苗中成功分离和纯化了高纯度的总RNA和mRNA.并以无NaCl处理为Driver,以 200 mmol/L NaCl处理 24 h、48 h、72 h的幼苗为Tester,通过cDNA双链的合成及两次PCR扩增,富集到两组处理中差异表达的大小在200～1 300 的cDNA序列,pGEM-T的连接和蓝白斑筛选表明杂交文库滴度和重组率分别达到2.6×107和96%,共收集阳性克隆12 000个, 形成了抑制消减杂交的质粒cDNA文库.随机挑取酶切质粒的电泳分析表明,载体中均有插入片段.两种RNA提取方法的结合有效提高了多汁多色素海蓬子RNA的质量,高效抑制消减杂交文库的建立为进一步分析基因的差异表达及分离抗盐基因奠定了基础.
위제고축협육질염생식물해봉자총RNA화mRNA적질량,장개량CTAB법여Tripure 시제합방법상결합, 종 300 mg해봉자발아후20 d적유묘중성공분리화순화료고순도적총RNA화mRNA.병이무NaCl처리위Driver,이 200 mmol/L NaCl처리 24 h、48 h、72 h적유묘위Tester,통과cDNA쌍련적합성급량차PCR확증,부집도량조처리중차이표체적대소재200～1 300 적cDNA서렬,pGEM-T적련접화람백반사선표명잡교문고적도화중조솔분별체도2.6×107화96%,공수집양성극륭12 000개, 형성료억제소감잡교적질립cDNA문고.수궤도취매절질립적전영분석표명,재체중균유삽입편단.량충RNA제취방법적결합유효제고료다즙다색소해봉자RNA적질량,고효억제소감잡교문고적건립위진일보분석기인적차이표체급분리항염기인전정료기출.