中国人兽共患病学报
中國人獸共患病學報
중국인수공환병학보
CHINESE JOURNAL OF ZOONOSES
2010年
9期
825-829,834
,共6页
蒋就喜%房修罗%沈继龙%胡婷婷
蔣就喜%房脩囉%瀋繼龍%鬍婷婷
장취희%방수라%침계룡%호정정
日本血吸虫%信号蛋白14-3-3%谷胱甘肽S转移酶%重组蛋白%联合免疫
日本血吸蟲%信號蛋白14-3-3%穀胱甘肽S轉移酶%重組蛋白%聯閤免疫
일본혈흡충%신호단백14-3-3%곡광감태S전이매%중조단백%연합면역
目的 观察日本血吸虫重组信号蛋白14-3-3(rSj14-3-3)疫苗和重组M r2600谷胱甘肽S转移酶(rSj26GST)疫苗联合免疫对小鼠的保护作用.方法 将含有Sj14-3-3和Sj26GST编码基因的菌株E. Coli BL21/ p ET28a 涂布LB/Kana/ IPTG/ X-gal平板,培养、收集细菌、超声碎菌、分离、纯化,分别取5μL进行SDS-PAGE,观察纯化结果,采用BCA法测定重组蛋白的浓度.联合免疫组BALB/c小鼠分别在第0、2、4周用rSj14-3-3疫苗rSj26GST疫苗联合免疫; 而单独免疫的rSj14-3-3组及rSj26GST组,与上组同步各自免疫3次.末次免疫后2周进行感染攻击,45d后剖杀,计数成虫及肝内虫卵.同时设PBS对照组.计算各组间的减虫率和减卵率,以及虫卵肉芽肿的大小.结果 联合免疫组的减虫率为38.38%,显著高于rSj14-3-3(16.98%)和 rSj26GST组(26.80% ) ( P< 0.01).联合免疫组以及 rSj14-3-3、rSj26GST组减卵率分别为48.81%、25.27%、41.41%;联合免疫组rSj14-3-3和rSj26GST组 , 肝组织中每条雌虫平均产卵数显著低于PBS对照组( P< 0.01).联合组小鼠虫卵肉芽肿的直径为(173.9±35.0μm),显著小于对照组(267.7±28.6μm)( P < 0.01),联合组亦明显低于rSj14-3-3和rSj26GST组(P< 0.01).结论 联合免疫组的保护作用优于rSj14-3-3和rSj26GST单独免疫组.且联合免疫疫苗具有一定的抗虫卵肉芽肿及抗肝纤维化作用.
目的 觀察日本血吸蟲重組信號蛋白14-3-3(rSj14-3-3)疫苗和重組M r2600穀胱甘肽S轉移酶(rSj26GST)疫苗聯閤免疫對小鼠的保護作用.方法 將含有Sj14-3-3和Sj26GST編碼基因的菌株E. Coli BL21/ p ET28a 塗佈LB/Kana/ IPTG/ X-gal平闆,培養、收集細菌、超聲碎菌、分離、純化,分彆取5μL進行SDS-PAGE,觀察純化結果,採用BCA法測定重組蛋白的濃度.聯閤免疫組BALB/c小鼠分彆在第0、2、4週用rSj14-3-3疫苗rSj26GST疫苗聯閤免疫; 而單獨免疫的rSj14-3-3組及rSj26GST組,與上組同步各自免疫3次.末次免疫後2週進行感染攻擊,45d後剖殺,計數成蟲及肝內蟲卵.同時設PBS對照組.計算各組間的減蟲率和減卵率,以及蟲卵肉芽腫的大小.結果 聯閤免疫組的減蟲率為38.38%,顯著高于rSj14-3-3(16.98%)和 rSj26GST組(26.80% ) ( P< 0.01).聯閤免疫組以及 rSj14-3-3、rSj26GST組減卵率分彆為48.81%、25.27%、41.41%;聯閤免疫組rSj14-3-3和rSj26GST組 , 肝組織中每條雌蟲平均產卵數顯著低于PBS對照組( P< 0.01).聯閤組小鼠蟲卵肉芽腫的直徑為(173.9±35.0μm),顯著小于對照組(267.7±28.6μm)( P < 0.01),聯閤組亦明顯低于rSj14-3-3和rSj26GST組(P< 0.01).結論 聯閤免疫組的保護作用優于rSj14-3-3和rSj26GST單獨免疫組.且聯閤免疫疫苗具有一定的抗蟲卵肉芽腫及抗肝纖維化作用.
목적 관찰일본혈흡충중조신호단백14-3-3(rSj14-3-3)역묘화중조M r2600곡광감태S전이매(rSj26GST)역묘연합면역대소서적보호작용.방법 장함유Sj14-3-3화Sj26GST편마기인적균주E. Coli BL21/ p ET28a 도포LB/Kana/ IPTG/ X-gal평판,배양、수집세균、초성쇄균、분리、순화,분별취5μL진행SDS-PAGE,관찰순화결과,채용BCA법측정중조단백적농도.연합면역조BALB/c소서분별재제0、2、4주용rSj14-3-3역묘rSj26GST역묘연합면역; 이단독면역적rSj14-3-3조급rSj26GST조,여상조동보각자면역3차.말차면역후2주진행감염공격,45d후부살,계수성충급간내충란.동시설PBS대조조.계산각조간적감충솔화감란솔,이급충란육아종적대소.결과 연합면역조적감충솔위38.38%,현저고우rSj14-3-3(16.98%)화 rSj26GST조(26.80% ) ( P< 0.01).연합면역조이급 rSj14-3-3、rSj26GST조감란솔분별위48.81%、25.27%、41.41%;연합면역조rSj14-3-3화rSj26GST조 , 간조직중매조자충평균산란수현저저우PBS대조조( P< 0.01).연합조소서충란육아종적직경위(173.9±35.0μm),현저소우대조조(267.7±28.6μm)( P < 0.01),연합조역명현저우rSj14-3-3화rSj26GST조(P< 0.01).결론 연합면역조적보호작용우우rSj14-3-3화rSj26GST단독면역조.차연합면역역묘구유일정적항충란육아종급항간섬유화작용.
