中华关节外科杂志（电子版）
中華關節外科雜誌（電子版）
중화관절외과잡지（전자판）
CHINESE JOURNAL OF JOINT SURGERY(ELECTRONIC VERSION)
2011年
3期
335-342
,共8页
张平%蔡道章%刘斌%钟志宏%潘永谦%张振山
張平%蔡道章%劉斌%鐘誌宏%潘永謙%張振山
장평%채도장%류빈%종지굉%반영겸%장진산
受体,白细胞介素1%转化生长因子%基因转移技术%软骨细胞
受體,白細胞介素1%轉化生長因子%基因轉移技術%軟骨細胞
수체,백세포개소1%전화생장인자%기인전이기술%연골세포
目的 探讨重组人IL-1Ra和TGF-β1双基因在体外对兔骨性关节炎软骨退变的治疗效果.方法 取新西兰大白兔关节软骨,经消化分离,软骨细胞以1.5×105/ml浓度培养于6孔培养板.软骨细胞分为5组,转染IL-1Ra组、转染TGF-β1组、转染IL-1Ra+TGF-β1双基因组、未转染组、空白组.上述转染组均以LipofectamineTM 2000 Reagent脂质体为转染媒介.各组加入软骨块,除空白组外,其余各组均加入20 ng IL-1β.于第6天后每组各取4孔1.5 ml培养基,ELISA法检测TGF-β1和IL-1Ra的含量,RIA法检测IL-1β和TNF-α的含量.收集软骨块做HE染色、阿尔新蓝染色及Ⅱ型胶原免疫组化检测等组织学观察.结果 转染组IL-1Ra或TGF-β1有较高的表达水平;转染组IL-1β和TNF-α的表达水平降低,在双基因组降低最明显,与单基因组之间有显著性差异(P<0.05).转基因组基质染色均比未转染组着色较深.在双基因组软骨细胞排列尚整齐,细胞数量多,基质深染.结论 联合基因治疗效果优于单基因,为体外骨性关节炎的基因治疗提供实验基础.
目的 探討重組人IL-1Ra和TGF-β1雙基因在體外對兔骨性關節炎軟骨退變的治療效果.方法 取新西蘭大白兔關節軟骨,經消化分離,軟骨細胞以1.5×105/ml濃度培養于6孔培養闆.軟骨細胞分為5組,轉染IL-1Ra組、轉染TGF-β1組、轉染IL-1Ra+TGF-β1雙基因組、未轉染組、空白組.上述轉染組均以LipofectamineTM 2000 Reagent脂質體為轉染媒介.各組加入軟骨塊,除空白組外,其餘各組均加入20 ng IL-1β.于第6天後每組各取4孔1.5 ml培養基,ELISA法檢測TGF-β1和IL-1Ra的含量,RIA法檢測IL-1β和TNF-α的含量.收集軟骨塊做HE染色、阿爾新藍染色及Ⅱ型膠原免疫組化檢測等組織學觀察.結果 轉染組IL-1Ra或TGF-β1有較高的錶達水平;轉染組IL-1β和TNF-α的錶達水平降低,在雙基因組降低最明顯,與單基因組之間有顯著性差異(P<0.05).轉基因組基質染色均比未轉染組著色較深.在雙基因組軟骨細胞排列尚整齊,細胞數量多,基質深染.結論 聯閤基因治療效果優于單基因,為體外骨性關節炎的基因治療提供實驗基礎.
목적 탐토중조인IL-1Ra화TGF-β1쌍기인재체외대토골성관절염연골퇴변적치료효과.방법 취신서란대백토관절연골,경소화분리,연골세포이1.5×105/ml농도배양우6공배양판.연골세포분위5조,전염IL-1Ra조、전염TGF-β1조、전염IL-1Ra+TGF-β1쌍기인조、미전염조、공백조.상술전염조균이LipofectamineTM 2000 Reagent지질체위전염매개.각조가입연골괴,제공백조외,기여각조균가입20 ng IL-1β.우제6천후매조각취4공1.5 ml배양기,ELISA법검측TGF-β1화IL-1Ra적함량,RIA법검측IL-1β화TNF-α적함량.수집연골괴주HE염색、아이신람염색급Ⅱ형효원면역조화검측등조직학관찰.결과 전염조IL-1Ra혹TGF-β1유교고적표체수평;전염조IL-1β화TNF-α적표체수평강저,재쌍기인조강저최명현,여단기인조지간유현저성차이(P<0.05).전기인조기질염색균비미전염조착색교심.재쌍기인조연골세포배렬상정제,세포수량다,기질심염.결론 연합기인치료효과우우단기인,위체외골성관절염적기인치료제공실험기출.
