复旦学报（医学版）
複旦學報（醫學版）
복단학보（의학판）
FUDAN UNIVERSITY JOURNAL OF MEDICAL SCIENCES
2011年
6期
485-491
,共7页
成小林%李正东%蒋蓓琦%庄志刚%庄传经
成小林%李正東%蔣蓓琦%莊誌剛%莊傳經
성소림%리정동%장배기%장지강%장전경
LKB1基因%胚胎发育信号通路%cAMP/PKA信号通路%乳腺癌
LKB1基因%胚胎髮育信號通路%cAMP/PKA信號通路%乳腺癌
LKB1기인%배태발육신호통로%cAMP/PKA신호통로%유선암
目的 探讨抑癌基因LKB1与胚胎发育(Sonic Hedgehog,SHH)信号通路、cAMP/PKA信号通路之间的相互关系.方法 抑癌基因LKB1转染人乳腺癌细胞MDA-MB-231,分MDA-MB-231组(231组)和转染LKB1基因的MDA-MB-231(LKB1组)两组,每组分别采用0、5× 10-6、1×10-5、2× 10-5 mol/L等4种浓度的SHH信号通路抑制剂环靶明( cyclopamine)作用于细胞,各小组细胞分别用RT-PCR法和Western blot法检测SHH-信号通路相关基因SHH、Smo的mRNA表达水平和蛋白表达水平,用cAMP、PKA试剂盒检测cAMP、PKA数值水平.结果 LKB1组的细胞通过不同剂量环靶明抑制后,SHH信号通路相关基因SHH、Smo的mRNA和蛋白表达水平相应较231组明显抑制,且与环靶明剂量呈正相关,抑制效果在环靶明浓度为10 × 10-6mol/L时最明显,继续增加环靶明浓度到20 × 10-6mol/L,抑制效果保持不变.231组和LKB1组中细胞的PKA和cAMP数值均随环靶明浓度增加而增高,至10×10-6mol/L时达到最高,继续增加环靶明浓度到20×10- 6mol/L,两组中的PKA和cAMP数值保持不变.在相同环靶明浓度下,LKB1组中PKA和cAMP数值高于231组中相应数值.结论 抑癌基因LKB1协同环靶明抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞的SHH信号通路的同时亦协同增加cAMP/PKA信号通路的表达,且在环靶明浓度为10× 10-6 mol/L时效果最明显；推测存在LKB1-SHH-cAMP/PKA通路.
目的 探討抑癌基因LKB1與胚胎髮育(Sonic Hedgehog,SHH)信號通路、cAMP/PKA信號通路之間的相互關繫.方法 抑癌基因LKB1轉染人乳腺癌細胞MDA-MB-231,分MDA-MB-231組(231組)和轉染LKB1基因的MDA-MB-231(LKB1組)兩組,每組分彆採用0、5× 10-6、1×10-5、2× 10-5 mol/L等4種濃度的SHH信號通路抑製劑環靶明( cyclopamine)作用于細胞,各小組細胞分彆用RT-PCR法和Western blot法檢測SHH-信號通路相關基因SHH、Smo的mRNA錶達水平和蛋白錶達水平,用cAMP、PKA試劑盒檢測cAMP、PKA數值水平.結果 LKB1組的細胞通過不同劑量環靶明抑製後,SHH信號通路相關基因SHH、Smo的mRNA和蛋白錶達水平相應較231組明顯抑製,且與環靶明劑量呈正相關,抑製效果在環靶明濃度為10 × 10-6mol/L時最明顯,繼續增加環靶明濃度到20 × 10-6mol/L,抑製效果保持不變.231組和LKB1組中細胞的PKA和cAMP數值均隨環靶明濃度增加而增高,至10×10-6mol/L時達到最高,繼續增加環靶明濃度到20×10- 6mol/L,兩組中的PKA和cAMP數值保持不變.在相同環靶明濃度下,LKB1組中PKA和cAMP數值高于231組中相應數值.結論 抑癌基因LKB1協同環靶明抑製乳腺癌MDA-MB-231細胞的SHH信號通路的同時亦協同增加cAMP/PKA信號通路的錶達,且在環靶明濃度為10× 10-6 mol/L時效果最明顯；推測存在LKB1-SHH-cAMP/PKA通路.
목적 탐토억암기인LKB1여배태발육(Sonic Hedgehog,SHH)신호통로、cAMP/PKA신호통로지간적상호관계.방법 억암기인LKB1전염인유선암세포MDA-MB-231,분MDA-MB-231조(231조)화전염LKB1기인적MDA-MB-231(LKB1조)량조,매조분별채용0、5× 10-6、1×10-5、2× 10-5 mol/L등4충농도적SHH신호통로억제제배파명( cyclopamine)작용우세포,각소조세포분별용RT-PCR법화Western blot법검측SHH-신호통로상관기인SHH、Smo적mRNA표체수평화단백표체수평,용cAMP、PKA시제합검측cAMP、PKA수치수평.결과 LKB1조적세포통과불동제량배파명억제후,SHH신호통로상관기인SHH、Smo적mRNA화단백표체수평상응교231조명현억제,차여배파명제량정정상관,억제효과재배파명농도위10 × 10-6mol/L시최명현,계속증가배파명농도도20 × 10-6mol/L,억제효과보지불변.231조화LKB1조중세포적PKA화cAMP수치균수배파명농도증가이증고,지10×10-6mol/L시체도최고,계속증가배파명농도도20×10- 6mol/L,량조중적PKA화cAMP수치보지불변.재상동배파명농도하,LKB1조중PKA화cAMP수치고우231조중상응수치.결론 억암기인LKB1협동배파명억제유선암MDA-MB-231세포적SHH신호통로적동시역협동증가cAMP/PKA신호통로적표체,차재배파명농도위10× 10-6 mol/L시효과최명현；추측존재LKB1-SHH-cAMP/PKA통로.
