江苏农业科学
江囌農業科學
강소농업과학
JIANGSU AGRICULTURAL SCIENCES
2011年
6期
43-46
,共4页
芸薹属%甘蓝型油菜%RNAi%透明种皮8(TT8)%载体构建
蕓薹屬%甘藍型油菜%RNAi%透明種皮8(TT8)%載體構建
예대속%감람형유채%RNAi%투명충피8(TT8)%재체구건
类黄酮是植物的重要次生代谢物质,拟南芥透明种皮8(TT8)是调控花青素苷、原花青素、种皮黏液生物合成的1个转录因子,参与决定植株彩色、种皮色泽、种皮黏液分泌等性状.本研究采用PCR法从甘蓝型油菜中克隆了592 bp(不计人工酶切位点)的芸薹属TT8基因家族的RNA干扰片段,将其反义片段、正义片段采用No Ⅰ+Swa Ⅰ、BamH Ⅰ+Xba Ⅰ双酶切方式分别插入到改进型植物RNA干扰平台载体pFGC5941M的启动子与间隔区、间隔区与终止子之间,形成了11 380bp的重组载体pFCC5941M - BTT8 Ⅰ(简称为pBTT8 Ⅰ),多种PCR鉴定结果表明构建成功;然后转化根癌农杆菌,获得工程菌株,可用于芸薹属植物相关性状的分子机理研究和遗传修饰.
類黃酮是植物的重要次生代謝物質,擬南芥透明種皮8(TT8)是調控花青素苷、原花青素、種皮黏液生物閤成的1箇轉錄因子,參與決定植株綵色、種皮色澤、種皮黏液分泌等性狀.本研究採用PCR法從甘藍型油菜中剋隆瞭592 bp(不計人工酶切位點)的蕓薹屬TT8基因傢族的RNA榦擾片段,將其反義片段、正義片段採用No Ⅰ+Swa Ⅰ、BamH Ⅰ+Xba Ⅰ雙酶切方式分彆插入到改進型植物RNA榦擾平檯載體pFGC5941M的啟動子與間隔區、間隔區與終止子之間,形成瞭11 380bp的重組載體pFCC5941M - BTT8 Ⅰ(簡稱為pBTT8 Ⅰ),多種PCR鑒定結果錶明構建成功;然後轉化根癌農桿菌,穫得工程菌株,可用于蕓薹屬植物相關性狀的分子機理研究和遺傳脩飾.
류황동시식물적중요차생대사물질,의남개투명충피8(TT8)시조공화청소감、원화청소、충피점액생물합성적1개전록인자,삼여결정식주채색、충피색택、충피점액분비등성상.본연구채용PCR법종감람형유채중극륭료592 bp(불계인공매절위점)적예대속TT8기인가족적RNA간우편단,장기반의편단、정의편단채용No Ⅰ+Swa Ⅰ、BamH Ⅰ+Xba Ⅰ쌍매절방식분별삽입도개진형식물RNA간우평태재체pFGC5941M적계동자여간격구、간격구여종지자지간,형성료11 380bp적중조재체pFCC5941M - BTT8 Ⅰ(간칭위pBTT8 Ⅰ),다충PCR감정결과표명구건성공;연후전화근암농간균,획득공정균주,가용우예대속식물상관성상적분자궤리연구화유전수식.