色谱
色譜
색보
CHINESE JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY
2012年
8期
822-826
,共5页
阳离子交换色谱%凝胶排阻色谱%血管生长抑制剂Kringle 5%分离%纯化
暘離子交換色譜%凝膠排阻色譜%血管生長抑製劑Kringle 5%分離%純化
양리자교환색보%응효배조색보%혈관생장억제제Kringle 5%분리%순화
Kringle 5是血纤维蛋白溶酶原中特异抑制内皮细胞增生和迁移活性最高的一种血管生成抑制剂.该实验在前期成功克隆和表达可溶性非融合血管生成抑制剂Kringle 5的基础上,建立了一种两步色谱法分离纯化Kringle5的方法.首先用SP Sepharose Fast Flow强阳离子交换色谱柱对Kringle 5重组菌体破碎上清液进行初步分离,然后再用丙烯葡聚糖凝胶S-100 HR凝胶排阻色谱柱对其进行进一步的纯化.采用本方法得到的可溶性非融合血管生成抑制剂Kringle 5经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳和高效凝胶排阻色谱检测其纯度大于98％,通过鸡胚尿囊膜法确定这种蛋白质具有抑制内皮毛细血管生长的活性.
Kringle 5是血纖維蛋白溶酶原中特異抑製內皮細胞增生和遷移活性最高的一種血管生成抑製劑.該實驗在前期成功剋隆和錶達可溶性非融閤血管生成抑製劑Kringle 5的基礎上,建立瞭一種兩步色譜法分離純化Kringle5的方法.首先用SP Sepharose Fast Flow彊暘離子交換色譜柱對Kringle 5重組菌體破碎上清液進行初步分離,然後再用丙烯葡聚糖凝膠S-100 HR凝膠排阻色譜柱對其進行進一步的純化.採用本方法得到的可溶性非融閤血管生成抑製劑Kringle 5經十二烷基硫痠鈉-聚丙烯酰胺凝膠電泳和高效凝膠排阻色譜檢測其純度大于98％,通過鷄胚尿囊膜法確定這種蛋白質具有抑製內皮毛細血管生長的活性.
Kringle 5시혈섬유단백용매원중특이억제내피세포증생화천이활성최고적일충혈관생성억제제.해실험재전기성공극륭화표체가용성비융합혈관생성억제제Kringle 5적기출상,건립료일충량보색보법분리순화Kringle5적방법.수선용SP Sepharose Fast Flow강양리자교환색보주대Kringle 5중조균체파쇄상청액진행초보분리,연후재용병희포취당응효S-100 HR응효배조색보주대기진행진일보적순화.채용본방법득도적가용성비융합혈관생성억제제Kringle 5경십이완기류산납-취병희선알응효전영화고효응효배조색보검측기순도대우98％,통과계배뇨낭막법학정저충단백질구유억제내피모세혈관생장적활성.
