眼视光学杂志
眼視光學雜誌
안시광학잡지
CHINESE JOURNAL OF OPTOMEY & OPHTHALMOLOGY
2007年
4期
222-224,227
,共4页
组织型谷氨酰胺转移酶%反义药物%小梁细胞
組織型穀氨酰胺轉移酶%反義藥物%小樑細胞
조직형곡안선알전이매%반의약물%소량세포
目的 通过计算机程序模拟组织型谷氨酰胺转移酶(tissue transglutaminase,tTG)基因的mRNA二级结构,优化硫代反义寡核苷酸 (antisense oligodeoxynucleotide.ASODN)药物设计,为有效抑制小梁细胞表达tTG提供新的途径.方法 根据牛tTG mPNA的二级结构,选择环与茎结合区(280～300bp)和茎区(2720～2740bp)作为反义药物作用的靶点,分别合成ASODN1、ASODN2,用脂质体包埋后转染牛眼小梁细胞.通过半定量RT-PCR法检测转染后tTGmRNA表达的变化来评价tTG-ASODN的生物学效应.结果 ASODN1、ASODN2对tTG mRNA的表达均有抑制作用,与空白对照组相比差异有显著性(P＜0.05),且tTG-ASODN1抑制作用明显强于tTG-ASODN2 (P＜0.05). 结论 选择环与茎连接的部位作为反义作用的靶点,其反义作用明显强于茎区.从机制上讲,可能是因为环与茎连接的部位的形成需要吸收能量,是整个tTG mRNA序列中最不稳定的区域,ASODN容易接近而发挥作用,提示通过tTG mRNA二级结构的模拟而选择ASODN是设计反义药物的新途径.
目的 通過計算機程序模擬組織型穀氨酰胺轉移酶(tissue transglutaminase,tTG)基因的mRNA二級結構,優化硫代反義寡覈苷痠 (antisense oligodeoxynucleotide.ASODN)藥物設計,為有效抑製小樑細胞錶達tTG提供新的途徑.方法 根據牛tTG mPNA的二級結構,選擇環與莖結閤區(280～300bp)和莖區(2720～2740bp)作為反義藥物作用的靶點,分彆閤成ASODN1、ASODN2,用脂質體包埋後轉染牛眼小樑細胞.通過半定量RT-PCR法檢測轉染後tTGmRNA錶達的變化來評價tTG-ASODN的生物學效應.結果 ASODN1、ASODN2對tTG mRNA的錶達均有抑製作用,與空白對照組相比差異有顯著性(P＜0.05),且tTG-ASODN1抑製作用明顯彊于tTG-ASODN2 (P＜0.05). 結論 選擇環與莖連接的部位作為反義作用的靶點,其反義作用明顯彊于莖區.從機製上講,可能是因為環與莖連接的部位的形成需要吸收能量,是整箇tTG mRNA序列中最不穩定的區域,ASODN容易接近而髮揮作用,提示通過tTG mRNA二級結構的模擬而選擇ASODN是設計反義藥物的新途徑.
목적 통과계산궤정서모의조직형곡안선알전이매(tissue transglutaminase,tTG)기인적mRNA이급결구,우화류대반의과핵감산 (antisense oligodeoxynucleotide.ASODN)약물설계,위유효억제소량세포표체tTG제공신적도경.방법 근거우tTG mPNA적이급결구,선택배여경결합구(280～300bp)화경구(2720～2740bp)작위반의약물작용적파점,분별합성ASODN1、ASODN2,용지질체포매후전염우안소량세포.통과반정량RT-PCR법검측전염후tTGmRNA표체적변화래평개tTG-ASODN적생물학효응.결과 ASODN1、ASODN2대tTG mRNA적표체균유억제작용,여공백대조조상비차이유현저성(P＜0.05),차tTG-ASODN1억제작용명현강우tTG-ASODN2 (P＜0.05). 결론 선택배여경련접적부위작위반의작용적파점,기반의작용명현강우경구.종궤제상강,가능시인위배여경련접적부위적형성수요흡수능량,시정개tTG mRNA서렬중최불은정적구역,ASODN용역접근이발휘작용,제시통과tTG mRNA이급결구적모의이선택ASODN시설계반의약물적신도경.
