中国预防兽医学报
中國預防獸醫學報
중국예방수의학보
CHINESE JOURNAL OF PREVENTIVE VETERINARY MEDICINE
2004年
2期
86-89
,共4页
马相如%胡勤芹%肖少波%方六荣%陈焕春
馬相如%鬍勤芹%肖少波%方六榮%陳煥春
마상여%호근근%초소파%방륙영%진환춘
伪狂犬病病毒%UL31基因%克隆%序列分析%表达
偽狂犬病病毒%UL31基因%剋隆%序列分析%錶達
위광견병병독%UL31기인%극륭%서렬분석%표체
以伪狂犬病病毒Ea株基因组DNA为模板,通过PCR扩增含UL31基因的1 000bp片段,扩增产物克隆于pMD18-T中,双脱氧末端终止法序列测定.通过OM1GA2.0软件包分析发现,Ea株UL31基因编码271个氨基酸,蛋白质分子量为30.38 kD,与Ka株UL31基因核苷酸与氨基酸序列同源性均在98%以上.将α-疱疹病毒亚科9个不同成员UL31同源基因编码的氨基酸序列进行多重比对分析,发现4个保守的功能性结构域.将该片段插入原核表达载体pGEX-KG中GST下游,构建的原核表达质粒pGEX-UL31在大肠杆菌BL32(DE3)中获得了高效表达,SDS-PAGE结果显示,表达的融合蛋白质分子量为56 kD.
以偽狂犬病病毒Ea株基因組DNA為模闆,通過PCR擴增含UL31基因的1 000bp片段,擴增產物剋隆于pMD18-T中,雙脫氧末耑終止法序列測定.通過OM1GA2.0軟件包分析髮現,Ea株UL31基因編碼271箇氨基痠,蛋白質分子量為30.38 kD,與Ka株UL31基因覈苷痠與氨基痠序列同源性均在98%以上.將α-皰疹病毒亞科9箇不同成員UL31同源基因編碼的氨基痠序列進行多重比對分析,髮現4箇保守的功能性結構域.將該片段插入原覈錶達載體pGEX-KG中GST下遊,構建的原覈錶達質粒pGEX-UL31在大腸桿菌BL32(DE3)中穫得瞭高效錶達,SDS-PAGE結果顯示,錶達的融閤蛋白質分子量為56 kD.
이위광견병병독Ea주기인조DNA위모판,통과PCR확증함UL31기인적1 000bp편단,확증산물극륭우pMD18-T중,쌍탈양말단종지법서렬측정.통과OM1GA2.0연건포분석발현,Ea주UL31기인편마271개안기산,단백질분자량위30.38 kD,여Ka주UL31기인핵감산여안기산서렬동원성균재98%이상.장α-포진병독아과9개불동성원UL31동원기인편마적안기산서렬진행다중비대분석,발현4개보수적공능성결구역.장해편단삽입원핵표체재체pGEX-KG중GST하유,구건적원핵표체질립pGEX-UL31재대장간균BL32(DE3)중획득료고효표체,SDS-PAGE결과현시,표체적융합단백질분자량위56 kD.
