微生物学通报
微生物學通報
미생물학통보
MICROBIOLOGY
2006年
5期
65-69
,共5页
龙良鲲%邓名荣%曲新勇%朱红惠
龍良鯤%鄧名榮%麯新勇%硃紅惠
룡량곤%산명영%곡신용%주홍혜
植物防御素%PD5基因%分泌表达%抑菌活性
植物防禦素%PD5基因%分泌錶達%抑菌活性
식물방어소%PD5기인%분비표체%억균활성
将植物防御素PD5基因克隆到载体pPIC9的Xhol Ⅰ和EcoR Ⅰ位点之间,得到重组载体pPIC9/PD5.pPIC9/PD5经Bgl Ⅱ线性化,电转化法转入Pichia pastoris GS115,MD和MM平板筛选表型为His+MutS的转化子,PCR鉴定阳性转化子.转化子D24用BMGY培养至OD600为6.0时,经BMM诱导,上清液用Tricien-SDS-PAGE可检测到目标条带.同时经平板抑菌试验显示,D24的诱导发酵上清液可很好的抑制香蕉枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp. Cubense)及甘蓝黑腐菌[Xanthomona campestris (Smith) Dovosen]的生长.植物防御素PD5基因在毕赤酵母中得到表达.
將植物防禦素PD5基因剋隆到載體pPIC9的Xhol Ⅰ和EcoR Ⅰ位點之間,得到重組載體pPIC9/PD5.pPIC9/PD5經Bgl Ⅱ線性化,電轉化法轉入Pichia pastoris GS115,MD和MM平闆篩選錶型為His+MutS的轉化子,PCR鑒定暘性轉化子.轉化子D24用BMGY培養至OD600為6.0時,經BMM誘導,上清液用Tricien-SDS-PAGE可檢測到目標條帶.同時經平闆抑菌試驗顯示,D24的誘導髮酵上清液可很好的抑製香蕉枯萎菌(Fusarium oxysporum f.sp. Cubense)及甘藍黑腐菌[Xanthomona campestris (Smith) Dovosen]的生長.植物防禦素PD5基因在畢赤酵母中得到錶達.
장식물방어소PD5기인극륭도재체pPIC9적Xhol Ⅰ화EcoR Ⅰ위점지간,득도중조재체pPIC9/PD5.pPIC9/PD5경Bgl Ⅱ선성화,전전화법전입Pichia pastoris GS115,MD화MM평판사선표형위His+MutS적전화자,PCR감정양성전화자.전화자D24용BMGY배양지OD600위6.0시,경BMM유도,상청액용Tricien-SDS-PAGE가검측도목표조대.동시경평판억균시험현시,D24적유도발효상청액가흔호적억제향초고위균(Fusarium oxysporum f.sp. Cubense)급감람흑부균[Xanthomona campestris (Smith) Dovosen]적생장.식물방어소PD5기인재필적효모중득도표체.
