世界华人消化杂志
世界華人消化雜誌
세계화인소화잡지
WORLD CHINESE JOURNAL OF DIGESTOLOGY
2007年
4期
323-331
,共9页
陈浩莉%邹来玉%李建英%王小众%陈治新%黄月红
陳浩莉%鄒來玉%李建英%王小衆%陳治新%黃月紅
진호리%추래옥%리건영%왕소음%진치신%황월홍
环氧合酶-2%5-脂氧合酶%联合抑制%AGS细胞%增殖%凋亡
環氧閤酶-2%5-脂氧閤酶%聯閤抑製%AGS細胞%增殖%凋亡
배양합매-2%5-지양합매%연합억제%AGS세포%증식%조망
目的:通过单独及联合应用选择性COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861处理胃癌细胞系AGS,比较各实验组的增殖凋亡率,探讨联合抑制COX-2和5-LOX两条通路对胃癌细胞系AGS增殖凋亡的影响.方法:AGS细胞在含100 mL/L小牛血清+100kU/L青、链霉素的RPMI1640培养基中培养,取对数生长期细胞做为实验组.以相差显微镜观察药物处理前后的细胞形态改变;设立AA861(25,50,100 μmol/L)组,尼美舒利(50,100,200 μmol/L)组,及AA861联合尼美舒利处理组(50 μmol/L AA861+100 μmol/L尼美舒利),用四氮唑蓝(MTT)法在24,48,72 h测量细胞吸光度,以此检测单用及联用AA861与尼美舒利对细胞生长增殖的影响;实验通过脱氧核糖核酸末端转移酶介导的dUTP缺口末端标记法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法检测细胞凋亡率,以DNA-LADDER法观察凋亡.结果:相差显微镜观察,药物处理组细胞与对照组相比,形态发生明显改变.MTT显示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h处理组及AA861 25 μmol/L的24 h处理组外,尼美舒利和AA861基本呈时间、剂量依赖性抑制AGS细胞增殖.TUNEL染色法表明,尼美舒利或AA861处理组的细胞凋亡率随着剂量的增加而升高.药物处理48 h后,MTT法表明,细胞增殖在AA861组和尼美舒利组与两药联用组间相比差异显著(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.01;0.211±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.05);TUNEL染色法表明,单药组与两药联用组细胞凋亡率相比差异明显(AA861组:1 8.67%±0.03%,尼美舒利组:20.94%±0.48%vs两药联用组:23.76%±0.92%,P＜0.01);AO/EB染色法也同时表明,细胞凋亡单药组与两药联用组相比差异明显(AA861组:18.17%±0.28%、尼美舒利组:19.35%±0.74% vs两药联用组:23.78%±0.04%,P＜0.01).DNA琼脂糖凝胶电泳法显示,两药联合处理AGS细胞组与单药处理组比较,癌细胞增殖被抑制,凋亡明显增加.结论:COX-2抑制剂尼美舒利和5-LOX抑制剂AA861对胃癌AGS细胞的增殖抑制以及促凋亡作用基本呈时间浓度依赖性.联用尼美舒利和AA861抑制COX-2与5-LOX两条通路,与单独抑制其中一条通路比较,能更有效抑制胃癌细胞增殖,促进凋亡.
目的:通過單獨及聯閤應用選擇性COX-2抑製劑尼美舒利和5-LOX抑製劑AA861處理胃癌細胞繫AGS,比較各實驗組的增殖凋亡率,探討聯閤抑製COX-2和5-LOX兩條通路對胃癌細胞繫AGS增殖凋亡的影響.方法:AGS細胞在含100 mL/L小牛血清+100kU/L青、鏈黴素的RPMI1640培養基中培養,取對數生長期細胞做為實驗組.以相差顯微鏡觀察藥物處理前後的細胞形態改變;設立AA861(25,50,100 μmol/L)組,尼美舒利(50,100,200 μmol/L)組,及AA861聯閤尼美舒利處理組(50 μmol/L AA861+100 μmol/L尼美舒利),用四氮唑藍(MTT)法在24,48,72 h測量細胞吸光度,以此檢測單用及聯用AA861與尼美舒利對細胞生長增殖的影響;實驗通過脫氧覈糖覈痠末耑轉移酶介導的dUTP缺口末耑標記法(TUNEL)和吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)染色法檢測細胞凋亡率,以DNA-LADDER法觀察凋亡.結果:相差顯微鏡觀察,藥物處理組細胞與對照組相比,形態髮生明顯改變.MTT顯示,除尼美舒利200μmol/L的24,48 h處理組及AA861 25 μmol/L的24 h處理組外,尼美舒利和AA861基本呈時間、劑量依賴性抑製AGS細胞增殖.TUNEL染色法錶明,尼美舒利或AA861處理組的細胞凋亡率隨著劑量的增加而升高.藥物處理48 h後,MTT法錶明,細胞增殖在AA861組和尼美舒利組與兩藥聯用組間相比差異顯著(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.01;0.211±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.05);TUNEL染色法錶明,單藥組與兩藥聯用組細胞凋亡率相比差異明顯(AA861組:1 8.67%±0.03%,尼美舒利組:20.94%±0.48%vs兩藥聯用組:23.76%±0.92%,P＜0.01);AO/EB染色法也同時錶明,細胞凋亡單藥組與兩藥聯用組相比差異明顯(AA861組:18.17%±0.28%、尼美舒利組:19.35%±0.74% vs兩藥聯用組:23.78%±0.04%,P＜0.01).DNA瓊脂糖凝膠電泳法顯示,兩藥聯閤處理AGS細胞組與單藥處理組比較,癌細胞增殖被抑製,凋亡明顯增加.結論:COX-2抑製劑尼美舒利和5-LOX抑製劑AA861對胃癌AGS細胞的增殖抑製以及促凋亡作用基本呈時間濃度依賴性.聯用尼美舒利和AA861抑製COX-2與5-LOX兩條通路,與單獨抑製其中一條通路比較,能更有效抑製胃癌細胞增殖,促進凋亡.
목적:통과단독급연합응용선택성COX-2억제제니미서리화5-LOX억제제AA861처리위암세포계AGS,비교각실험조적증식조망솔,탐토연합억제COX-2화5-LOX량조통로대위암세포계AGS증식조망적영향.방법:AGS세포재함100 mL/L소우혈청+100kU/L청、련매소적RPMI1640배양기중배양,취대수생장기세포주위실험조.이상차현미경관찰약물처리전후적세포형태개변;설립AA861(25,50,100 μmol/L)조,니미서리(50,100,200 μmol/L)조,급AA861연합니미서리처리조(50 μmol/L AA861+100 μmol/L니미서리),용사담서람(MTT)법재24,48,72 h측량세포흡광도,이차검측단용급련용AA861여니미서리대세포생장증식적영향;실험통과탈양핵당핵산말단전이매개도적dUTP결구말단표기법(TUNEL)화아정등/추화을정(AO/EB)염색법검측세포조망솔,이DNA-LADDER법관찰조망.결과:상차현미경관찰,약물처리조세포여대조조상비,형태발생명현개변.MTT현시,제니미서리200μmol/L적24,48 h처리조급AA861 25 μmol/L적24 h처리조외,니미서리화AA861기본정시간、제량의뢰성억제AGS세포증식.TUNEL염색법표명,니미서리혹AA861처리조적세포조망솔수착제량적증가이승고.약물처리48 h후,MTT법표명,세포증식재AA861조화니미서리조여량약련용조간상비차이현저(0.240±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.01;0.211±0.002 vs 0.207±0.001,P＜0.05);TUNEL염색법표명,단약조여량약련용조세포조망솔상비차이명현(AA861조:1 8.67%±0.03%,니미서리조:20.94%±0.48%vs량약련용조:23.76%±0.92%,P＜0.01);AO/EB염색법야동시표명,세포조망단약조여량약련용조상비차이명현(AA861조:18.17%±0.28%、니미서리조:19.35%±0.74% vs량약련용조:23.78%±0.04%,P＜0.01).DNA경지당응효전영법현시,량약연합처리AGS세포조여단약처리조비교,암세포증식피억제,조망명현증가.결론:COX-2억제제니미서리화5-LOX억제제AA861대위암AGS세포적증식억제이급촉조망작용기본정시간농도의뢰성.련용니미서리화AA861억제COX-2여5-LOX량조통로,여단독억제기중일조통로비교,능경유효억제위암세포증식,촉진조망.
