第三军医大学学报
第三軍醫大學學報
제삼군의대학학보
ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE
2007年
16期
1572-1575
,共4页
冯起甲%徐智%吴国明%徐顺贵%李树钧%陈维中%郭芮伶
馮起甲%徐智%吳國明%徐順貴%李樹鈞%陳維中%郭芮伶
풍기갑%서지%오국명%서순귀%리수균%진유중%곽예령
LBP%CD14%噬菌体肽库%模拟肽
LBP%CD14%噬菌體肽庫%模擬肽
LBP%CD14%서균체태고%모의태
目的 应用噬菌体随机12肽库筛选脂多糖结合蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)与CD14结合位点的多肽序列.方法 以CD14为固相筛选分子,对噬菌体12肽库进行4轮亲合筛选,采用酶联免疫吸附(ELISA)法鉴定筛选后的噬菌体克隆与CD14的结合活性,取结合活性较高的克隆进行DNA测序,推导其多肽序列并与LBP序列比对,再进行竞争抑制实验检测筛选噬菌体与LBP竞争结合CD14的效力.结果 挑取的20个噬菌体克隆中,16个结合实验鉴定阳性,取6个亲和力最高的克隆测序,得到3条不同编码的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAFHRAHHLTSP),3条多肽与LBP一级结构同源性低,为模拟肽.6个噬菌体克隆有较高的竞争抑制率.结论 用噬菌体12肽库成功筛选出LBP与CD14结合位点的模拟肽.
目的 應用噬菌體隨機12肽庫篩選脂多糖結閤蛋白(lipopolysaccharide binding protein,LBP)與CD14結閤位點的多肽序列.方法 以CD14為固相篩選分子,對噬菌體12肽庫進行4輪親閤篩選,採用酶聯免疫吸附(ELISA)法鑒定篩選後的噬菌體剋隆與CD14的結閤活性,取結閤活性較高的剋隆進行DNA測序,推導其多肽序列併與LBP序列比對,再進行競爭抑製實驗檢測篩選噬菌體與LBP競爭結閤CD14的效力.結果 挑取的20箇噬菌體剋隆中,16箇結閤實驗鑒定暘性,取6箇親和力最高的剋隆測序,得到3條不同編碼的12肽序列(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL和AAFHRAHHLTSP),3條多肽與LBP一級結構同源性低,為模擬肽.6箇噬菌體剋隆有較高的競爭抑製率.結論 用噬菌體12肽庫成功篩選齣LBP與CD14結閤位點的模擬肽.
목적 응용서균체수궤12태고사선지다당결합단백(lipopolysaccharide binding protein,LBP)여CD14결합위점적다태서렬.방법 이CD14위고상사선분자,대서균체12태고진행4륜친합사선,채용매련면역흡부(ELISA)법감정사선후적서균체극륭여CD14적결합활성,취결합활성교고적극륭진행DNA측서,추도기다태서렬병여LBP서렬비대,재진행경쟁억제실험검측사선서균체여LBP경쟁결합CD14적효력.결과 도취적20개서균체극륭중,16개결합실험감정양성,취6개친화력최고적극륭측서,득도3조불동편마적12태서렬(FHRWPTWPLPSP、MHRHPPPITLPL화AAFHRAHHLTSP),3조다태여LBP일급결구동원성저,위모의태.6개서균체극륭유교고적경쟁억제솔.결론 용서균체12태고성공사선출LBP여CD14결합위점적모의태.
