华夏医学
華夏醫學
화하의학
ACTA MEDICINAE SINICA
2008年
4期
606-608
,共3页
李康智%秦胜花%乔伟%冯乐平
李康智%秦勝花%喬偉%馮樂平
리강지%진성화%교위%풍악평
脐带血%单核细胞%细胞分离%细胞冻存与复苏
臍帶血%單覈細胞%細胞分離%細胞凍存與複囌
제대혈%단핵세포%세포분리%세포동존여복소
目的:通过对脐带血有核细胞(CBNC)的提取和保存方法探讨,为脐带血有核细胞分离、储存和应用提供科学依据.方法:采用3种方法(Ficoll-Paque分离液法、1%甲基纤维素法、红细胞裂解法)分离CBNC,并应用不同储存液在不同时间对细胞进行冷冻和复苏培养.结果:红细胞裂解液法分离所获得的有核细胞数分别是Ficoll-Paque分离液方法的2.9倍(P＜0.05)和1%甲基纤维素分离方法的10倍(P＜0.01);且红细胞裂解液法所得有核细胞种类(包括淋巴细胞、中性粒细胞和单核细胞)也明显增多;细胞集落形成率与前两种方法比较亦有显著性差异.H3-TdR掺入的细胞活力观察发现,在4℃和20℃条件下存放24h,不同温度下细胞活力没有明显改变.以人脐血血清+DMSO为保护液在液氮储存CBNC 1年,复苏后仍有很强的细胞集落形成能力.结论:应用红细胞裂解液分离提取CBNC获得的细胞数量和种类优于其他两种方法.CBNC冻存时适当加入人脐血清,复苏后克隆形成能力明显增强.
目的:通過對臍帶血有覈細胞(CBNC)的提取和保存方法探討,為臍帶血有覈細胞分離、儲存和應用提供科學依據.方法:採用3種方法(Ficoll-Paque分離液法、1%甲基纖維素法、紅細胞裂解法)分離CBNC,併應用不同儲存液在不同時間對細胞進行冷凍和複囌培養.結果:紅細胞裂解液法分離所穫得的有覈細胞數分彆是Ficoll-Paque分離液方法的2.9倍(P＜0.05)和1%甲基纖維素分離方法的10倍(P＜0.01);且紅細胞裂解液法所得有覈細胞種類(包括淋巴細胞、中性粒細胞和單覈細胞)也明顯增多;細胞集落形成率與前兩種方法比較亦有顯著性差異.H3-TdR摻入的細胞活力觀察髮現,在4℃和20℃條件下存放24h,不同溫度下細胞活力沒有明顯改變.以人臍血血清+DMSO為保護液在液氮儲存CBNC 1年,複囌後仍有很彊的細胞集落形成能力.結論:應用紅細胞裂解液分離提取CBNC穫得的細胞數量和種類優于其他兩種方法.CBNC凍存時適噹加入人臍血清,複囌後剋隆形成能力明顯增彊.
목적:통과대제대혈유핵세포(CBNC)적제취화보존방법탐토,위제대혈유핵세포분리、저존화응용제공과학의거.방법:채용3충방법(Ficoll-Paque분리액법、1%갑기섬유소법、홍세포렬해법)분리CBNC,병응용불동저존액재불동시간대세포진행냉동화복소배양.결과:홍세포렬해액법분리소획득적유핵세포수분별시Ficoll-Paque분리액방법적2.9배(P＜0.05)화1%갑기섬유소분리방법적10배(P＜0.01);차홍세포렬해액법소득유핵세포충류(포괄림파세포、중성립세포화단핵세포)야명현증다;세포집락형성솔여전량충방법비교역유현저성차이.H3-TdR참입적세포활력관찰발현,재4℃화20℃조건하존방24h,불동온도하세포활력몰유명현개변.이인제혈혈청+DMSO위보호액재액담저존CBNC 1년,복소후잉유흔강적세포집락형성능력.결론:응용홍세포렬해액분리제취CBNC획득적세포수량화충류우우기타량충방법.CBNC동존시괄당가입인제혈청,복소후극륭형성능력명현증강.
