CAJ | 학술논문

目的:探讨细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin dependent kinase,CDK)对原发性肝癌(肝癌)细胞增殖及凋亡的影响.方法:对体外培养的肝癌细胞株SMMC-7721分别予浓度为0 μmol/L、2 μmol/L、4 μmol/L、8 μmol/L、16 μmol/L、32 μmol/L CDK 抑制剂roscovitine干预72 h,分别通过倒置显微镜、四甲基偶氮唑蓝法、流式细胞仪、逆转录PCR法观察SMMC-7721细胞的生长、增殖,细胞周期时相的分布、凋亡以及CDK2、半胱氨酸蛋白酶-3和BCL-2 mRNA的表达.结果:予roscovitine 干预72 h后,光镜下可见随着roscovitine浓度的增加,部分细胞核固缩、胞体折光性减弱、胞浆内可见有颗粒和核碎片形成,其中以32 μmol/L组的改变最为明显.四甲基偶氮唑蓝法结果显示,不同浓度的roscovitine对细胞生长均有一定的抑制作用, roscovitine对细胞的抑制作用呈剂量依赖性和时间依赖性.流式细胞仪检测发现,经roscovitine干预后肝癌细胞 G0期、G1期及凋亡细胞的比例增加.逆转录PCR发现,随着roscovitine浓度的增加,CDK2 mRNA及凋亡相关基因BCL-2 mRNA水平降低,半胱氨酸蛋白酶-3 mRNA表达升高.结论:CDK表达降低可抑制增殖期肝癌细胞的增殖,诱导细胞的凋亡,凋亡机制可能与BCL-2、半胱氨酸蛋白酶-3的表达改变有关.CDK在肝癌细胞增殖及凋亡中起着重要作用.
목적:탐토세포주기단백의뢰격매(cyclin dependent kinase,CDK)대원발성간암(간암)세포증식급조망적영향.방법:대체외배양적간암세포주SMMC-7721분별여농도위0 μmol/L、2 μmol/L、4 μmol/L、8 μmol/L、16 μmol/L、32 μmol/L CDK 억제제roscovitine간예72 h,분별통과도치현미경、사갑기우담서람법、류식세포의、역전록PCR법관찰SMMC-7721세포적생장、증식,세포주기시상적분포、조망이급CDK2、반광안산단백매-3화BCL-2 mRNA적표체.결과:여roscovitine 간예72 h후,광경하가견수착roscovitine농도적증가,부분세포핵고축、포체절광성감약、포장내가견유과립화핵쇄편형성,기중이32 μmol/L조적개변최위명현.사갑기우담서람법결과현시,불동농도적roscovitine대세포생장균유일정적억제작용, roscovitine대세포적억제작용정제량의뢰성화시간의뢰성.류식세포의검측발현,경roscovitine간예후간암세포 G0기、G1기급조망세포적비례증가.역전록PCR발현,수착roscovitine농도적증가,CDK2 mRNA급조망상관기인BCL-2 mRNA수평강저,반광안산단백매-3 mRNA표체승고.결론:CDK표체강저가억제증식기간암세포적증식,유도세포적조망,조망궤제가능여BCL-2、반광안산단백매-3적표체개변유관.CDK재간암세포증식급조망중기착중요작용.